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文檔簡介
1、達(dá)托霉素(Daptomycin)是一種由13個氨基酸組成的新型脂肽類抗生素,其中十個氨基酸組成一個氨基酸環(huán),另有3個氨基酸排列成線狀,這三個氨基酸末端的L-色氨酸接著一個十碳癸酸。達(dá)托霉素由玫瑰孢鏈霉菌發(fā)酵生成,具有在體外抗絕大多數(shù)的臨床革蘭陽性菌的作用,主要用于耐藥菌,如耐萬古霉素的腸球菌(VRE),耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)等。2003年,達(dá)托霉素被FDA批準(zhǔn)在美國上市,主要用于皮膚和軟組織感染治療。目前國內(nèi)達(dá)托霉素發(fā)酵的研究極
2、少,產(chǎn)量較低、無法應(yīng)用到商業(yè)生成中。因此,對達(dá)托霉素發(fā)酵進(jìn)行深入的研究和開發(fā)具有重要意義。本文圍繞如何提高達(dá)托霉素的產(chǎn)量和質(zhì)量,對生產(chǎn)菌種的選育、培養(yǎng)基優(yōu)化、發(fā)酵工藝等方面進(jìn)行了系統(tǒng)研究,獲得了如下結(jié)果: 以玫瑰孢鏈霉菌LD-1為出發(fā)菌株,經(jīng)硫酸二乙酯和激光誘變處理,并選用鏈霉素作為抗性篩選劑,最終選育出一株高產(chǎn)達(dá)托霉素的突變株LC-54,該菌在未優(yōu)化條件下的達(dá)托霉素產(chǎn)量達(dá)到34.29mg/L,比出發(fā)菌株提高了194%。經(jīng)驗(yàn)證,
3、菌株LC-54的遺傳性能穩(wěn)定。 研究了菌株LC-54的搖瓶分批發(fā)酵條件。確定了最佳種齡和培養(yǎng)條件,并利用SAS軟件設(shè)計(jì)了較好的發(fā)酵培養(yǎng)基??疾炝私臃N量、搖床轉(zhuǎn)速、發(fā)酵培養(yǎng)基及初始pH對玫瑰孢鏈霉菌合成達(dá)托霉素的影響,對發(fā)酵培養(yǎng)基條件進(jìn)行了優(yōu)化。在最適發(fā)酵條件下,菌株LC-54搖瓶分批發(fā)酵生產(chǎn)達(dá)托霉素的產(chǎn)量可達(dá)到54.50mg/L,比初始條件(34.29mg/L)的產(chǎn)量提高了58.9%。 研究了前體癸酸對玫瑰孢鏈霉菌合成達(dá)
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