果膠低聚寡糖的酶法制備及其抑菌活性研究.pdf

1、果膠是一種以半乳糖醛酸為主要組成單糖的酸性多糖，是植物細(xì)胞壁的一種重要組成成分，廣泛存在于果蔬的根、莖和葉中。高分子的果膠一般沒有抑菌活性，但是當(dāng)果膠降解到一定程度后顯示出明顯的抑菌活性，可為開發(fā)新型天然食品防腐劑開辟一條新途徑，但是目前對其抑菌活性的構(gòu)效關(guān)系尚沒有任何報道。本研究以純化果膠內(nèi)切酶為果膠降解酶，以對大腸桿菌、傷寒沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、八疊球菌和枯草芽孢桿菌的抑菌活性為指標(biāo)，在優(yōu)化了最佳抑菌活性的酶解條件的基礎(chǔ)上，探討了

2、果膠低聚寡糖的理化性質(zhì)與抑菌活性的關(guān)系，為果膠低聚寡糖的抑菌機理提供科學(xué)理論依據(jù)。 研究的主要內(nèi)容及結(jié)果如下： 1、果膠內(nèi)切酶的分離純化及酶學(xué)特性研究：利用Sephacryl S-300凝膠柱層析對商品果膠酶進(jìn)行分離純化，得到兩種酶PG1和PG2，TLC結(jié)果表明PG2為內(nèi)切酶，其最適pH值為4.5，最適溫度為35℃。 2、果膠內(nèi)切酶酶解產(chǎn)物抑菌活性初探：利用果膠內(nèi)切酶PG2對果膠進(jìn)行酶解，得到不同酶解率的果膠酶解

3、液。通過比較不同酶解率的果膠酶解液大腸桿菌、傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、八疊球菌和枯草芽孢桿菌的抑菌效果，確定了制備果膠低聚寡糖的最佳條件。結(jié)果如下： 果膠內(nèi)切酶的酶解效果要明顯的優(yōu)于商品果膠酶，其在120min時的酶解率分別為72.83％和58.53％； 果膠本身并沒有抑菌活性，但是果膠酶解液具有非常好的抑菌效果，最大抑菌圈直徑可達(dá)17mm；果膠內(nèi)切酶酶解90min，酶解率為71％時，抑菌活性最強； 90mi

4、n果膠內(nèi)切酶酶解液的抑菌活性要優(yōu)于食品中常用防腐劑山梨酸鉀。 3、果膠低聚寡糖的分離純化及其抑菌活性研究：首先利用Sephadex G-15凝膠柱層析對90min時的果膠內(nèi)切酶酶解液進(jìn)行分離純化，得到PF1和PF2兩個峰，TLC結(jié)果表明，PF2為果膠低聚寡糖和半乳糖醛酸的混合物，PF1為果膠低聚寡糖和多聚半乳糖醛酸的混合物。 PF1的分離純化及其抑菌活性研究：首先對PF1進(jìn)行抑菌試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，其對大腸桿菌、傷寒沙門氏

5、茵、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌和八疊球菌均具有非常好的抑菌效果，抑菌圈直徑達(dá)到了20mm以上：利用DEAE-Sephacel纖維素離子交換柱層析對PF1進(jìn)行分離純化，得到TPF1，TPF2，TPF3，TPF4和TPF5五個組分，其應(yīng)為分子量大于1500的聚合半乳糖醛酸，抑菌活性隨著分子中半乳糖醛酸殘基所占比例的增加而升高。 PF2的分離純化及其抑菌活性研究：PF2對大腸桿菌、傷寒沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌和八疊球