酶法制備馬鈴薯淀粉磷酸寡糖及相關(guān)酶系的研究.pdf

1、磷酸寡糖（Phosphoryl Oligosaccharides，POs）是指麥芽低聚糖中的某些葡萄糖殘基與磷酸根共價(jià)連接的一種新型的功能性低聚糖。馬鈴薯磷酸寡糖是從馬鈴薯淀粉酶解液中得到的含有磷酸基團(tuán)的麥芽低聚糖。除了具有一般低聚糖的生理功能外，還具有促進(jìn)鈣，鐵等礦物質(zhì)吸收的功能。
　　 本文闡述了以馬鈴薯淀粉水解液為原料，采用酶法制備磷酸寡糖。并且比較了馬鈴薯淀粉水解法，馬鈴薯淀粉磷酸酯化水解法，玉米淀粉制備麥芽低聚糖酯化法

2、等幾種不同的制備方法。其中玉米淀粉制備麥芽低聚糖酯化法所得到的磷酸寡糖得率為最大（3.989％）。
　　 本文以纖維素陰離子交換樹脂為柱材料，分離出了一組磷酸寡糖，對(duì)其組分進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)脫去磷酸根的POs主要是由麥芽三糖，麥芽四糖，麥芽五糖，麥芽六糖等組成。計(jì)算出PO1與PO2部分的磷酸根聚合度分別為3.98和5.78。
　　 除此之外，由于水解馬鈴薯淀粉存在所用的耐高溫α-淀粉酶、真菌α-淀粉酶、普魯蘭酶所需的最適p

3、H、溫度差異大，以及上述三種酶需由三種菌株產(chǎn)生、生產(chǎn)成本較高等問(wèn)題，我們對(duì)一組能同時(shí)產(chǎn)生酸性α-淀粉酶、糖化酶、異淀粉酶的黑曲霉菌種進(jìn)行了單因子試驗(yàn)。篩選到一株產(chǎn)酸性α-淀粉酶較佳的菌種P2301。并對(duì)其液態(tài)、固態(tài)發(fā)酵進(jìn)行了條件研究，確定最佳產(chǎn)酶因素，其中液態(tài)發(fā)酵的耐酸性α-淀粉酶最高酶活為38.29 IU/mL，糖化酶活為57.58 IU/mL，異淀粉酶活為47.6 U/mL。固態(tài)發(fā)酵的耐酸性α-淀粉酶最高酶活為779.9 U/g干曲

4、，糖化酶活為1215.8 IU/g干曲，異淀粉酶活為357U/g干曲。
　　 采用上述黑曲霉產(chǎn)生的復(fù)合酶系發(fā)酵所得酶液，進(jìn)行馬鈴薯淀粉水解，水解不存在pH、溫度調(diào)節(jié)和多個(gè)產(chǎn)酶菌種等問(wèn)題，所需反應(yīng)時(shí)間相對(duì)傳統(tǒng)制備磷酸寡糖工藝減少。在加入實(shí)驗(yàn)室自制酶液50 mL/g時(shí)，作用5h，液化較完全。
　　 磷酸寡糖是一組含有磷酸根的麥芽低聚糖，其分子量介于600-1500之間，因此使用納濾設(shè)備可以進(jìn)行分離。實(shí)驗(yàn)室用制備的馬鈴薯淀粉酶