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文檔簡介
1、海蜇(Rhopilema esculehtum)是一種經(jīng)濟(jì)價值、營養(yǎng)價值和藥用價值均極高的醫(yī)食同源性大型水母。糖蛋白是一種普遍存在于生物體內(nèi)的糖與蛋白質(zhì)的復(fù)合物,具有細(xì)胞間識別調(diào)控作用,還具有多種生物活性,如抗腫瘤活性、調(diào)節(jié)免疫活性等。細(xì)胞因子是一種可在細(xì)胞間傳遞信息的小分子糖蛋白或蛋白,是機(jī)體免疫系統(tǒng)重要的的組成部分。本課題著重對海蜇糖蛋白對細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量的影響進(jìn)行研究,對海蜇糖蛋白的免疫活性進(jìn)行分子水平的分析,旨在為我國海
2、蜇資源的開發(fā)利用提供一定的理論依據(jù),為新型免疫類藥物及保健食品的開發(fā)提供一定的理論參考。研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
1.體外實驗:處死小鼠,無菌取脾臟,分離得到淋巴細(xì)胞,分5組(正常對照組、模型對照組、海蜇糖蛋白高、中、低劑量組),給藥,置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。提取各組細(xì)胞總 RNA,逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA,采用熒光定量 PCR技術(shù)檢測各組Th1,Th2和Th17類細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量,實驗數(shù)據(jù)采用相對定量法進(jìn)行處理。實驗結(jié)果為,海蜇糖
3、蛋白可顯著提高 Th1類細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量,且高劑量組表現(xiàn)為與正常對照組無顯著差異;海蜇糖蛋白可顯著降低 Th2類和Th17類細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量,且中劑量組和高劑量組均與正常對照組無顯著差異。
2.體內(nèi)實驗:小鼠隨機(jī)分6組,即空白對照組、陽性對照組、模型對照組、海蜇糖蛋白高、中、低劑量組。建造模型,灌胃給藥21d后,處死小鼠,無菌取脾臟,分離得到淋巴細(xì)胞,提取細(xì)胞總 RNA,逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA,檢測各組Th1,Th
4、17和 Th2類細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量,實驗數(shù)據(jù)采用相對定量法進(jìn)行處理。實驗結(jié)果為,海蜇糖蛋白可顯著上調(diào) Th1類細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量,且糖蛋白高劑量組表現(xiàn)為與空白對照組無顯著性差異;海蜇糖蛋白可顯著下調(diào) Th2類和Th17類細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量,且糖蛋白高劑量組與空白對照組無顯著差異。
3.體內(nèi)外實驗結(jié)果顯示,海蜇糖蛋白通過細(xì)胞培養(yǎng)給藥和體內(nèi)灌胃給藥,對細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量的影響趨勢是一致的。推測海蜇糖蛋白可能是
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