醋酸格拉替雷誘導的CD8+調(diào)節(jié)性T細胞通過靶向致病性CD4+T細胞來治療小鼠炎癥性腸病.pdf

1、慢性腸炎特指腸道部位的以炎性細胞浸潤為特征的慢性疾病，發(fā)病誘因有多種因素共同作用，如微生物感染包括霉菌，細菌，原蟲，也可以因變態(tài)反應的誘因所致。炎癥性腸炎的是腹痛，腹瀉，水樣便，體重下降及消化不良癥狀，患者表現(xiàn)出血便時，如不及時治療會最終死亡。炎癥性腸炎(InflammatoryBowelDiseases，IBD)既有固有免疫細胞的活化又有獲得性免疫細胞的活化[1]。IBD的黏膜損傷涉及到活化的單核巨噬細胞和T細胞，這兩種活化的細胞被認

2、為是IBD病理變化的主要誘因[2-3]。盡管具體的致病機制還未知，但可以明確的是活化的CD4+T細胞幾乎在所有的IBD模型中都有發(fā)現(xiàn)，并通過滲透遷移至病灶部位加重病情[4]。除此之外，剔除掉活化的CD4+T細胞對小鼠的IBD起到緩解的作用[5]。
　　 CD8+T細胞的發(fā)育成熟在胸腺中完成，然而在健康人的外周血液循環(huán)中，也存在著不同分化階段的CD8+T細胞，這些細胞處于相對穩(wěn)定的平衡狀態(tài)。然而在某些病理狀態(tài)條件下，如炎癥，感染，

3、外周和中樞器官衰老，甚至大量飲酒都會導致處于不同分化階段的CD8+T細胞原有的平衡狀態(tài)被打破。有研究表明，這些變化與CD8+T細胞的CD8+CD28這一亞群的上調(diào)相關[6-9]。因為CD8+CD28-T細胞的亞群具有記憶性/活化性的雙重形態(tài)和功能，并在細胞表面表達大量共刺激分子如ICOS，PD-1，LFA-1，4-1BB[10-11]。而在小鼠實驗性腦脊髓炎(ExperimentalAllergicEncephalomyelitis，E

4、AE)[12]模型和由CD4+CD45+Rbhigh[13]誘發(fā)的小鼠炎癥性腸炎模型中，利用這群CD8+CD28-T細胞的過繼回輸給建模小鼠表現(xiàn)出有效的治療效果。
　　 近年來，盡管IBD的治療已取得很大進展，但大劑量的免疫調(diào)節(jié)劑或免疫抑制劑的應用會對機體造成潛在的風險，比如患者發(fā)生癌癥或是感染的可能性會大大增加[14-15]。調(diào)節(jié)性T細胞應用于臨床降低移植排斥方面已有多年，這提示，調(diào)節(jié)性T細胞可作為一種治療炎癥疾病的強有力的工

5、具。并且，有研究證明CD4+調(diào)節(jié)性T細胞在緩解IBD時發(fā)揮了很大的作用[16-18]。在CD8+T細胞亞群中包含一群CD8+調(diào)節(jié)性T細胞，有實驗證明這群細胞也可以緩解IBD[19-21]。
　　 我們之前的研究證明Qa-1限制性CD8+調(diào)節(jié)性T細胞能夠緩解由活化的CD4+T細胞造成的EAE病理損傷[22]。Qa-1限制性CD8+調(diào)節(jié)性T細胞可以被T細胞疫苗(T-cellvaccination，TCV)誘導出來[23]。值得注意的

6、，臨床上使用治療MS的藥物，醋酸格拉替雷(Glatirameracetate，GA)是由美國食品藥品監(jiān)督管理局(FoodandDrugAdministrationU.S.,FDA)批準并上市的藥物。有相關的實驗表明，在多種不同方法誘導的小鼠IBD模型中，GA具有緩解IBD病理損傷的作用[24]。GA治療MS主要通過誘導致病的Th1向Th2型細胞方向轉化[25]。最近一項研究也證實了，CD8+調(diào)節(jié)性T細胞的T細胞受體(Tcellrecep

7、tor，TCR)能識別非經(jīng)典MHCI分子Qa-1對自身抗原肽HSP60(Heatshockprotein60)的提呈，最終產(chǎn)生選擇性抑制或裂解致病性CD4+T細胞的效應[26-27]。因此，利用GA誘導出Qa-1限制性CD8+調(diào)節(jié)性T細胞并對小鼠IBD治療作用的研究有了理論支持和可行性。
　　 我們證實了，活化的CD4+T細胞通過分泌IL-4和IFN-(y)在DSS誘發(fā)的小鼠IBD疾病中起到加重病情的作用。有趣的是，GA免疫活化

8、的CD8+T細胞回輸?shù)紻SS誘發(fā)的小鼠IBD疾病中，對疾病的緩解是有治療效果的。為了進一步探索以上的治療機制，我們利用CD4+T細胞的封閉抗體將小鼠體內(nèi)的CD4+T細胞剔除掉，并用流式檢測，發(fā)現(xiàn)注射封閉CD4+T細胞抗體的小鼠和對照小鼠相比體內(nèi)幾乎沒有CD4+T的存在。此外我們用同一批次剔除CD4+T細胞的小鼠建立DSS誘發(fā)的小鼠IBD模型，發(fā)現(xiàn)無論是GA免疫活化的CD8+T細胞還是PBS免疫未活化的CD8+T細胞回輸都表現(xiàn)出治療效果。