2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、海洋微生物由于其特殊的生存環(huán)境,具有產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎、功能獨特的新型活性胞外多糖的潛力,是開發(fā)多糖類海洋新藥的重要資源。 近年來,海洋微生物胞外多糖作為活性物質(zhì)的新來源,在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域正日益受到人們的關(guān)注。本論文以12種海洋微生物發(fā)酵液提取的胞外多糖為研究對象,并對其產(chǎn)率、理化性質(zhì)、單糖組成和抗氧化活性進(jìn)行研究,從中篩選出深海真菌Penicillium sp.、海綿共附真菌Epicoccum nigrum和海洋放線菌THW-7A胞外

2、多糖,并進(jìn)一步分離純化,深入研究其理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和抗氧化活性。 以LEPS、JEPS和WEPS為研究對象,采用離子交換色譜和凝膠排阻色譜相結(jié)合對其進(jìn)行分離純化分別得到八種胞外多糖LEPS1-1、LEPS1-2、LEPS-2、JEPS-1、JEPS-2、WEPS-1、WEPS-2和WEPS-3。經(jīng)Shodex OH pak SB-804柱高效液相色譜分析,證明八種多糖都具有較高的純度。通過采用高碘酸氧化-Smith降解、甲基化等化

3、學(xué)方法及現(xiàn)代儀器分析手段,包括IR、GC、HPGPC、HPLC、GC-MS、NMR等,分別對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了深入研究,確定了它們的基本化學(xué)結(jié)構(gòu)特點。 結(jié)果表明:LEPS1-1主鏈?zhǔn)且?→2,1→6連接Man,其摩爾比近似為2:1,支鏈中主要為1→3連接的Glc,同時存在微量的1→2,4連接的Gal;LEPS1-2主鏈?zhǔn)?→2 Man和1→4 Man摩爾比近似1:1比例連接,支鏈?zhǔn)?→2,4 Gal為主,還含有較多的末端甘露糖和少量的

4、1→6 Man、1→2 Gal;LEPS-2結(jié)構(gòu)中主鏈?zhǔn)?→2 Man,1→6 Glc,而其支鏈?zhǔn)且?→2,4 Gal和1→4 Man為主。JEPS-1主鏈主要為1→2 Man,1→3 Man和1→2,3 Gal,支鏈為1→6Glc、1→4 Glc和1→3,6連接的Glc,同時存在大量1→Man。JEPS-2主鏈?zhǔn)?→4 Gal、1→6 Glc和1→3,6 Glc,支鏈?zhǔn)?→2 Glc,還含有較多的末端甘露糖和少量的1→3 Man、1→

5、2,3 Gal。WEPS-1的主鏈主要為1→2Man、1→3Man和1→2,3Man,并且摩爾比近似等于5:5:3,同時含有大量的末端Man和少量的1→6甘露糖。而WEPS-2主鏈主要是1→2Man、1→6Glc、1→3Glc、1→2,3Man和1→3,6Man,支鏈主要是1→Man和1→Glc鍵型。WEPS-1和WEPS-2的結(jié)構(gòu)相對簡單,均是分支度很少的近似直鏈的結(jié)構(gòu)。 采用溫和的0.01 mol L-1 HCl在60℃降解

6、3小時作為降解條件制備WEPS-3系列寡糖,利用HPGPC-RID經(jīng)Bio-Gel-P4凝膠柱對降解產(chǎn)物進(jìn)行分離制備獲得寡糖,在線示差檢測到8個寡糖組分(F2~F9),并對全排阻部分在相同條件下降解和純化得到7個寡糖組分(f2~f8)。將胞外多糖WEPS-3和獲得的寡糖組分進(jìn)行紅外光譜分析,結(jié)果表明分離得到的寡糖與原料多糖的譜圖十分相似,各種糖的特征吸收峰均未發(fā)生明顯改變,并通過ESI-MS分析確定了各組分的分子量大小,測定結(jié)果為F2~

7、F7的分子量分別為268 Da、518 Da、768 Da、1018 Da、1268 Da和1518 Da,f2~f4的分子量分別為268 Da、518 Da和768Da,結(jié)果證實F2~F7分別為聚合度1到6的糖單元,f2~f4分別為聚合度為1~3的糖單元。 同時結(jié)合1H-NMR、13C-NMR、DEPT、1H1H-COSY、HMQC、HMBC和ESI-CID-MS/MS等儀器分析手段對F2和F3片段進(jìn)行結(jié)構(gòu)和序列解析,結(jié)果表明

8、胞外多糖WEPS-3為α-2→8連接的聚合度為25的脫氨基神經(jīng)氨酸Kdn。這是首次報道從海洋放線菌THW-7A中獲得多聚Kdn唾液酸,此研究對海洋微生物胞外多糖的研究具有重要的參考價值。Kdn是唾液酸中神經(jīng)氨酸(Neuraminic acid)的衍生物。 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)根據(jù)某些身體的化學(xué)水平來臨床診斷和治療疾病,Kdn被證明和多種疾病有關(guān),例如腫瘤、癌癥、糖尿病、心血管疾病等;有人甚至認(rèn)為它們和進(jìn)化有關(guān),能增強生物體對環(huán)境的適應(yīng)性。近

9、期食品安全方面更進(jìn)一步強調(diào)了唾液酸的作用。據(jù)研究,母乳中唾液酸化的成分能幫助嬰兒抵抗腸道感染以及促進(jìn)記憶和智力的發(fā)育。但是作為母乳替代品的牛乳里面的唾液酸含量要大大低于母乳。 通過利用Fenton反應(yīng)檢測對羥基自由基、DPPH自由基、超氧陰離子自由基的清除能力以及抗脂質(zhì)過氧化和還原能力等實驗對八種胞外多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行了研究,并與陽性對照BHT和Vc進(jìn)行比較。 結(jié)果表明,JEPS-1和JEPS-2均表現(xiàn)出很強的抗氧

10、化活性; LEPS1-1,LEPS1-2和LEPS-2對清除超氧陰離子和抗脂質(zhì)過氧化的能力異常顯著;WEPS-1、WEPS-2和WEPS-3抗脂質(zhì)過氧化能力也非常強,其EC50值分別為0.59、0.43和0.34,并可與陽性對照Vc相比擬。 酸性多聚糖的抗氧化活性均高于中性多聚糖,推斷這可能與酸性多糖含有較多的帶負(fù)電荷的糖醛酸有關(guān),另外糖單元的類型和糖苷鍵的構(gòu)型,多糖的取代基,多糖的空間結(jié)構(gòu),多糖的分子量大小等也是影響多糖抗氧化

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