松木層孔菌胞外多糖結(jié)構(gòu)和生物活性研究.pdf

1、松木層孔菌（Phellinus pini）隸屬于擔(dān)子菌亞門，層菌綱，非褶菌目，多孔菌科，針層孔菌屬。本文通過液體發(fā)酵培養(yǎng)技術(shù)獲得松木層孔菌發(fā)酵液。 松木層孔菌發(fā)酵液經(jīng)乙醇沉淀，得到松木層孔菌胞外粗多糖CPPE，利用苯酚—硫酸法和凱氏定氮法測得該多糖的總糖含量和蛋白含量分別為33．56％和31．68％。 采用凍融分級、鏈霉蛋白酶和sevag法聯(lián)合脫蛋白及Sepharose CL-6B凝膠層析等方法對CPPE進(jìn)行純化，得到級

2、分PPE。PPE為淡黃色粉末，比旋光度為+21．3°，總糖含量為92．84％，HPLC檢驗(yàn)PPE為單一峰，平均分子量為39kDa，單糖組成為甘露糖、葡萄糖、半乳糖，其摩爾比為38．4：1．76：1。 采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化等化學(xué)分析方法及IR、GC、GC—MS、13C—NMR等儀器分析方法對PPE進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析。確定了PPE的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元。PPE的基本結(jié)構(gòu)為：α—（1→2）—D—Manp構(gòu)成主鏈，每8

3、個(gè)糖殘基構(gòu)成一個(gè)重復(fù)結(jié)構(gòu)單元，從Man的0-6分出支點(diǎn)連接側(cè)鏈，α—（1→2）—D—Manp和α—（1→2，6）—D—Manp的摩爾比為0．78：1；側(cè)鏈由α—（1→3）—D—Manp和α—（1→6）—D—Manp構(gòu)成，其摩爾比為3．71：1；Man構(gòu)成PPE的末端。 應(yīng)用MTT法，初步考察了PPE對小鼠體外淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果表明：PPE能促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖，同時(shí)也可協(xié)同有絲分裂原ConA和LPS促進(jìn)小鼠脾T、B淋巴細(xì)