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文檔簡介
1、松木層孔菌(Phellinus pini)隸屬于擔(dān)子菌亞門,層菌綱,非褶菌目,多孔菌科,針層孔菌屬。本文通過液體發(fā)酵培養(yǎng)技術(shù)獲得松木層孔菌發(fā)酵液。 松木層孔菌發(fā)酵液經(jīng)乙醇沉淀,得到松木層孔菌胞外粗多糖CPPE,利用苯酚—硫酸法和凱氏定氮法測得該多糖的總糖含量和蛋白含量分別為33.56%和31.68%。 采用凍融分級、鏈霉蛋白酶和sevag法聯(lián)合脫蛋白及Sepharose CL-6B凝膠層析等方法對CPPE進(jìn)行純化,得到級
2、分PPE。PPE為淡黃色粉末,比旋光度為+21.3°,總糖含量為92.84%,HPLC檢驗(yàn)PPE為單一峰,平均分子量為39kDa,單糖組成為甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩爾比為38.4:1.76:1。 采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化等化學(xué)分析方法及IR、GC、GC—MS、13C—NMR等儀器分析方法對PPE進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析。確定了PPE的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元。PPE的基本結(jié)構(gòu)為:α—(1→2)—D—Manp構(gòu)成主鏈,每8
3、個(gè)糖殘基構(gòu)成一個(gè)重復(fù)結(jié)構(gòu)單元,從Man的0-6分出支點(diǎn)連接側(cè)鏈,α—(1→2)—D—Manp和α—(1→2,6)—D—Manp的摩爾比為0.78:1;側(cè)鏈由α—(1→3)—D—Manp和α—(1→6)—D—Manp構(gòu)成,其摩爾比為3.71:1;Man構(gòu)成PPE的末端。 應(yīng)用MTT法,初步考察了PPE對小鼠體外淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果表明:PPE能促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖,同時(shí)也可協(xié)同有絲分裂原ConA和LPS促進(jìn)小鼠脾T、B淋巴細(xì)
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