一株海洋放線菌抗生物質(zhì)的分離和結(jié)構(gòu)初步分析.pdf

1、對(duì)廈門(mén)周邊海域采集的樣品采用稀釋涂平板法分離、純化、保藏各種海洋微生物，對(duì)篩選出的一株具有廣譜抗菌活性的海洋放線菌進(jìn)行研究，經(jīng)過(guò)形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化特征及16S rDNA鑒定為達(dá)松維爾擬諾卡菌。
　　 為了提高抗菌物質(zhì)的產(chǎn)量，采用響應(yīng)面法對(duì)DY2242菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化。
　　 首先利用單因素實(shí)驗(yàn)考查了不同介質(zhì)、碳源、氮源對(duì)菌株DY2242的影響，在此基礎(chǔ)上運(yùn)用PlackettBurman試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法篩選出

2、影響產(chǎn)抗菌物質(zhì)的三個(gè)主要因素：NaCl、麥芽糖和NaNO3濃度。用最陡爬坡實(shí)驗(yàn)逼近最大響應(yīng)區(qū)域，再利用BoxBehnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)及響應(yīng)面分析方法確定主要因素的最優(yōu)濃度：氯化鈉濃度為2.08％，麥芽糖濃度為3.08％，NaNO3濃度為0.875％。在培養(yǎng)基的優(yōu)化條件下，抗菌物質(zhì)的抑菌圈直徑由最初的25.5mm上升到31mm，增加約24％。此后，再對(duì)發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，表明起始最佳pH7.0，最佳接種菌齡72h，最佳接種量5％，最佳裝液量為

3、70ml（250ml三角瓶），最佳培養(yǎng)溫度為28℃，最佳培養(yǎng)時(shí)間5天，在此培養(yǎng)條件下進(jìn)行發(fā)酵，抗菌物質(zhì)的抑菌圈直徑由最初的25.5mm上升到33.5mm，增加約31.4％。
　　 通過(guò)菌株DY2242 抗菌物質(zhì)穩(wěn)定性的實(shí)驗(yàn)，表明其對(duì)UV、pH 均具有較好的穩(wěn)定性，抗菌物質(zhì)在高于100℃時(shí)部分失活。通過(guò)Sephadex LH20柱色譜分離后，經(jīng)抗菌活性檢測(cè)發(fā)現(xiàn)一個(gè)較強(qiáng)的活性峰。將此峰的洗脫液各組分進(jìn)行薄層色譜分析，選取斑點(diǎn)清晰且單