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文檔簡介
1、本論文研究工作是采集煙臺(tái)近海海底沉積物的樣品,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行了放線菌菌株的分離篩選,研究分離得到的放線菌的代謝產(chǎn)物,以尋找得到有生物活性的先導(dǎo)化合物。利用抗腫瘤篩選實(shí)驗(yàn),得到一株能產(chǎn)生強(qiáng)抗腫瘤活性的代謝產(chǎn)物的菌株B170104。
對(duì)菌株B170104進(jìn)行了10種培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件優(yōu)化,通過生物活性篩選,確定了利用OM培養(yǎng)基作為發(fā)酵培養(yǎng)基,pH值為7.8,發(fā)酵溫度是28℃條件下產(chǎn)代謝產(chǎn)物活性最好,為最佳發(fā)酵條件。進(jìn)行18L規(guī)模的發(fā)
2、酵,發(fā)酵富集了兩次,得到29.5g粗提物。經(jīng)過硅膠層析、凝膠層析以及高效液相色譜等技術(shù),純化得到6個(gè)化合物。進(jìn)行質(zhì)譜、核磁共振氫譜和碳譜以及二維核磁共振光譜測定,確定6個(gè)化合物的結(jié)構(gòu),其中化合物4,5,6分別是抗腫瘤抗生素放線菌素C2、放線菌素C3和放線菌素D,有很好的抗腫瘤活性,并且放線菌素C2和放線菌素C3含量較高。選擇兩種細(xì)胞作為受試細(xì)胞,對(duì)放線菌素4,5進(jìn)行單體化合物活性復(fù)篩,結(jié)果顯示其抗腫瘤活性非常顯著,并了解到其早已廣泛應(yīng)用
3、于臨床。因而以放線菌素C2、C3的含量為考察指標(biāo),對(duì)菌株B170104進(jìn)行培養(yǎng)基條件優(yōu)化,已期得到高產(chǎn)量放線菌素的發(fā)酵條件,結(jié)果顯示,以O(shè) M培養(yǎng)基作為發(fā)酵培養(yǎng)基,pH值為7.8,發(fā)酵溫度是28℃條件下產(chǎn)放線菌素最高,產(chǎn)量為44.972mg/L,143.229mg/L。
論文的主要研究結(jié)果如下:
(1)放線菌B170104培養(yǎng)條件優(yōu)化及活性初篩。
?。?)放線菌B170104規(guī)模發(fā)酵、活性追蹤及粗提物的分離純
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