膽色素原脫氨酶的性質(zhì)及其與大蒜綠變的關(guān)系.pdf

1、本試驗(yàn)以邳州大蒜鱗莖為研究對(duì)象，研究了膽色素原(PBG)含量、膽色素原脫氨酶(PBGD)活性和綠變強(qiáng)度在不同貯藏條件下隨大蒜貯藏時(shí)間變化的規(guī)律，探究了PBG和PBGD與大蒜綠變的關(guān)系。利用DEAE-Sepharose FF離子交換層析、PhenylSepharose CL-4B疏水作用層析和Sephadex G-200凝膠層析等方法對(duì)PBGD進(jìn)行了分離純化，并研究了PBGD的酶動(dòng)力學(xué)性質(zhì)及其影響因素。實(shí)驗(yàn)還探究了茶葉提取物、洋蔥汁以及銀

2、杏葉提取物對(duì)大蒜綠變的影響，以期找到控制大蒜綠變的具體措施。主要研究結(jié)果如下:
　　1.以10天為間隔測(cè)定了大蒜在4℃和室溫貯藏條件下的綠變強(qiáng)度、大蒜中PBG含量以及PBGD活性隨時(shí)間的變化規(guī)律。結(jié)果顯示:在貯藏前期，4℃和室溫條件下綠變強(qiáng)度總的趨勢(shì)在不斷增強(qiáng)，且4℃貯藏條件下的綠變強(qiáng)度增長(zhǎng)趨勢(shì)明顯，室溫條件下增長(zhǎng)趨勢(shì)緩慢;貯藏后期由于積累的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗，4℃和室溫條件下的綠變強(qiáng)度均有下降的趨勢(shì)。比較相同貯藏時(shí)間后的4℃和室溫下

3、大蒜的綠變強(qiáng)度，前者始終大于后者;PBG含量隨時(shí)間的變化趨勢(shì)，與相同條件下綠變強(qiáng)度的變化趨勢(shì)相同，由此可推出，PBG含量與綠變強(qiáng)度有相關(guān)性;PBGD活性測(cè)定結(jié)果與PBG含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，說(shuō)明PBGD活性與大蒜綠變強(qiáng)度有相關(guān)性，PBGD活性越大，則PBG含量越低，綠變強(qiáng)度越小。
　　2.利用DEAE-Sepharose FF離子交換層析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水作用層析和Sephadex G-200凝膠層

4、析等方法對(duì)PBGD進(jìn)行了分離純化，并研究了酶的動(dòng)力學(xué)特征，包括溫度、pH、底物濃度、金屬離子對(duì)酶活的影響，及米氏常數(shù)的測(cè)定。結(jié)果顯示:PBGD的最適溫度為37℃，最適pH為8.0，所測(cè)金屬離子中Al3+對(duì)PBGD有最好的激活作用，K+和Na+對(duì)PBGD的活性沒(méi)有影響。采用Lineweaver-Burk雙倒數(shù)作圖法，得出PBGD的最大反應(yīng)速度Vmax為357.1μg/h mg蛋白質(zhì)，米氏常數(shù)Km為0.68μg/mL。
　　3.實(shí)驗(yàn)探