傳染性脾腎壞死病毒（ISKNV）ORF48R功能研究.pdf

1、傳染性脾腎壞死病毒(ISKNV)會導(dǎo)致魚類產(chǎn)生嚴(yán)重的流行性疾病。魚被ISKNV感染后會出現(xiàn)皮下出血和異常水腫等主要癥狀。研究發(fā)現(xiàn)ISKNV ORF48R蛋白含有一個與血小板來源生長因子(platelet-derived growth factor，PDGF)/血管生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族保守結(jié)構(gòu)域相似的結(jié)構(gòu)域。ISKNV ORF48R蛋白在結(jié)構(gòu)上與腫大病毒和副痘病毒所

2、編碼的VEGF更為相似，而與魚類和哺乳動物所編碼的VEGF相差較大。我們利用模式動物斑馬魚來研究ISKNV ORF48R的基因功能。我們構(gòu)建一個含有ISKNV ORF48R全基因序列的DNA重組質(zhì)粒，并將該重組質(zhì)粒顯微注射到處于單細(xì)胞狀態(tài)的斑馬魚受精卵中。ISKNV ORF48R基因在斑馬魚胚胎中過表達(dá)，導(dǎo)致斑馬魚胚胎出現(xiàn)心包瘤和尾部腫大等癥狀，這表明ISKNV ORF48R可以誘導(dǎo)血管滲透性的改變。同時也發(fā)現(xiàn)可以刺激VEGF受體FLK

3、-1基因在斑馬魚背部大動脈和軸靜脈區(qū)域表達(dá)顯著增加。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)ISKNV ORF48R可與斑馬魚VEGF121之間產(chǎn)生協(xié)同作用，該作用對FLK-1基因表達(dá)的刺激作用要明顯強(qiáng)于ISKNV ORF48R或斑馬魚VEGF121單獨(dú)作用。然而在斑馬魚胚胎發(fā)育早期封閉FLK-1基因表達(dá)，則可以使ISKNV ORF48R基因過表達(dá)所誘導(dǎo)的心包瘤和尾部腫大等異常胚胎表型消失。由此可見，ISKNV ORF48R在ISKNV感染過程中可能具有VEGF