傳染性支氣管炎病毒嗜腎毒株的致病性分析.pdf

1、雞傳染性支氣管炎(IB)是由雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)引起的嚴(yán)重危害養(yǎng)雞業(yè)生產(chǎn)的重要的傳染性疫病。腎型毒株1962年首先被報道，目前在中國已成為主要流行毒株，使IB的防控變得越來越困難。為了了解嗜腎毒株的致病性及其在雞胚傳代過程中演化規(guī)律，為臨床上IB的防控提供理論指導(dǎo)，開展了本論文的研究。
　　 IBV嗜腎株SC021202分別接種1～42日齡的SPF雞后可引起不同日齡接種雞死亡，1日齡、7日齡、14日齡、21日齡、28日

2、齡、35日齡、42日齡試驗雞的死亡率分別為100％、60％、60％、40％、30％、20％和10％，隨著雛雞日齡的增加死亡率逐漸降低。1日齡感染雞死亡時間集中在接種后4-5天，隨著日齡的增加，死亡時間多在接種后5-8天之間。剖檢各日齡的死亡雞，均可觀察到腎臟典型的“花斑腎”樣病變。免疫組化染色顯示，病毒抗原主要分布于肺呼吸毛細(xì)管上皮細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞的細(xì)胞漿內(nèi)。感染雞排毒分析顯示，雞接種后2～10天從咽肛拭子病料中檢測到了病毒核酸，說

3、明雞感染后從第2天開始排毒，持續(xù)10天左右。病毒分離結(jié)果顯示，氣管、肺臟和腎臟三種組織的病毒分離率相同。免疫熒光抗體檢測結(jié)果顯示，雞感染后21天的血清抗體全部為陽性。
　　 為了解IBV嗜腎株SC021202在雞胚傳代過程中S1基因演變規(guī)律，本研究對SC021202毒株在SPF雞胚上進(jìn)行了連續(xù)傳代并測定了S1基因的序列。傳代結(jié)果顯示，隨著在雞胚傳代次數(shù)的增加，感染雞胚病變?nèi)找婷黠@，雞胚死亡率逐漸升高，死亡時間逐漸集中在接種后36

4、-72h，病毒的毒價從P1的104 EID50/0.1ml逐漸上升到P50的107 EID50/0.1 ml。取1、3、5、7、10、15、20、25、30、35、40、45和50代的病毒尿囊液抽提核酸，擴(kuò)增其S1全基因片段并測序。序列分析發(fā)現(xiàn)，不同代次雞胚尿囊毒間S1基因的核苷酸與氨基酸的同源性均較高，達(dá)98.4％～100％; S1基因的突變以點突變?yōu)橹鳎瑥牡?代開始，至50代共有20位核苷酸發(fā)生了變化，突變率為1.04％。