豬細小病毒滅活疫苗的研制及免疫效果試驗.pdf

1、豬細小病毒(Porcine Parvovirus，PPV)是在世界范圍內影響?zhàn)B豬業(yè)發(fā)展的重要病原之一，目前無有效的治療手段，只能采取疫苗免疫進行預防。目前已商品化的疫苗包括活疫苗和滅活疫苗，活疫苗由于存在與流行的強毒重組返強的風險而影響推廣，而普遍使用的滅活苗由于病毒效價低、抗原雜質多、佐劑效力差、疫苗副反應大等諸多缺點一直制約著疫苗的質量，目前研究較多的基因工程載體疫苗、亞單位疫苗、DNA疫苗等處于研究階段，距離商品化仍有距離，所以目

2、前對于豬細小病毒滅活疫苗的質量提高需求迫切。
　　本實驗從32份疑似病料中分離鑒定出了6株PPV毒株，經過馴化、繁殖性能和免疫原性的篩選，確定了FJ-11-21株作為疫苗的候選毒株，并建立了該毒株的種子批。然后進行了疫苗生產工藝的優(yōu)化，包括培養(yǎng)條件的篩選、抗原純化方法的篩選、滅活劑的篩選、佐劑的篩選，確定了以α-MEM培養(yǎng)液、同步接種、接種MOI為0.01、96小時收獲病毒為最佳培養(yǎng)條件，以300KD截留量的超濾法為最佳抗原純化方

3、法、以1：2000濃度的β-丙內酯滅活8小時為最佳滅活方法、以206佐劑為最佳佐劑的工藝參數。制備的疫苗安全性良好，可提供長達8個月的免疫保護期，疫苗的效檢可用豚鼠免疫測定HI效價作為替代檢驗方法。在豬場的免疫情況來看，陰性豬場的一次免疫對產仔情況無影響，母豬血清中HI抗體效價可維持7Log2以上8個月，陽性豬場的一次免疫，免疫組較對照組平均產仔數提高0.9頭-2.5頭，一月齡仔豬存活率提高2％-7.5%，母豬血清中HI抗體效價可維持8