上海市食品中單核細(xì)胞增生李斯特菌污染特征與菌膜形成能力的分析.pdf

1、單核細(xì)胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一種常見(jiàn)的食源性致病菌，在自然界中普遍存在，可通過(guò)食品感染人類(lèi)，致死率高達(dá)20％～30%。在食品生產(chǎn)環(huán)境中，該菌能形成菌膜以抵御消毒劑的傷害，從而增加食品在加工過(guò)程中被污染的幾率，帶來(lái)食品安全危害。
　　本研究從農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市和奶場(chǎng)采集食品樣品，采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB4789.30-2010并結(jié)合PCR方法，對(duì)648份食品進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)40份樣品具有陽(yáng)性結(jié)果，并分離得

2、到86株單增李斯特分離株，總檢出率6.17%。各類(lèi)食品檢出率由高到低依次為：生肉（15.96%）、速凍食品（9.90%）、熟肉（7.27%）、水產(chǎn)品（4.17%）、生乳（4.16%）、蔬菜（2.02%），乳制品和豆制品中沒(méi)有檢出該菌。該結(jié)果表明上海市單核細(xì)胞增生李斯特菌污染食品的廣泛性，其中生肉、速凍食品污染率較高，熟肉作為即食食品也存在該菌的污染，存在食品安全風(fēng)險(xiǎn)。
　　對(duì)分離得到的86株單核細(xì)胞增生李斯特菌進(jìn)行分型研究。采用血

3、清凝集和多重 PCR的方法，將86株分離株分成四個(gè)血清型：1/2a（n=62），1/2b（n=17）、1/2c（n=4）和3c（n=3）。致病性較強(qiáng)的血清型1/2a、1/2b占91.9%，說(shuō)明上海市食品中單核細(xì)胞增生李斯特菌存在較高致病風(fēng)險(xiǎn)。采用ERIC-PCR分型方法，將86株菌分成10個(gè)類(lèi)群，對(duì)比ERIC-PCR的指紋圖譜與血清分型結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩者呈現(xiàn)較高的相關(guān)性。ERIC-PCR不僅能區(qū)分單核細(xì)胞增生李斯特菌的不同血清型，還能進(jìn)一步

4、區(qū)分同一血清型中的不同亞型菌株。這些分型結(jié)果能為該菌的流行病學(xué)調(diào)查提供數(shù)據(jù)支持。
　　對(duì)所得分離株的菌膜形成能力及其在菌膜狀態(tài)下對(duì)消毒劑的抗性進(jìn)行了研究。通過(guò)96孔板結(jié)晶紫染色法，測(cè)定分離株的菌膜形成能力，不同菌株之間菌膜形成量存在差異（0.37~1.62），發(fā)現(xiàn)1/2b血清型菌株菌膜形成能力較強(qiáng)，冷凍加工能顯著影響菌膜形成能力。比較兩種消毒劑對(duì)菌膜的殺滅效果，H2O2消毒劑對(duì)菌膜的最低抑制濃度為7500~17500 ppm，Cl

5、O2消毒劑對(duì)菌膜的最低抑制濃度為10~30 ppm，前者在國(guó)標(biāo)推薦劑量下無(wú)法徹底殺滅菌膜中的單核細(xì)胞增生李斯特菌，且隨菌膜形成量的提高，滅菌效果下降；后者表現(xiàn)出較好的滅菌效果，且滅菌能力不受菌膜形成量的影響。
　　綜上所述，本研究對(duì)上海市食品中單核細(xì)胞增生李斯特菌的分布狀況做了初步描述，并從血清分型及分子分型兩個(gè)角度分析了單核細(xì)胞增生李斯特菌的污染特征。隨后，測(cè)定了分離株的菌膜形成能力及其在菌膜狀態(tài)下對(duì)消毒劑的抗性，以上結(jié)果為單核