JNK與Smad信號通路在小鼠肺纖維化中相互作用的研究及對Ⅰ型膠原表達的影響.pdf

1、目的：
　　利用Bleomycin制備的野生型雄性的健康的C57BL/6小鼠肺臟器官纖維化模型，探討JNK與Smad這兩條信號通路在肺纖維化的衍變過程之中的彼此關(guān)聯(lián)及二者對Ⅰ型膠原蛋白的影響。
　　方法：
　　實驗中我們選取雄性的、野生型、健康的C57BL/6實驗型小鼠96只，將其隨機平均分成四個組，分別是正常對照組、模型組、JNK阻斷組、p-Smad3阻斷組，為了便于統(tǒng)計對應(yīng)的簡寫為N組、M組、SP組、SB組，每組各

2、24只。除了正常對照組之外的其它三個組的小鼠模型，我們使用氣管內(nèi)滴注博萊霉素（Bleomycin， BLM）注射液的方法3.5mg/Kg，誘導(dǎo)小鼠模型的構(gòu)建，于造模完成后給予相應(yīng)藥物， N組給予等劑量的生理鹽水。模型制備完成之后的第7天、第14天、第28天三個時間點，在每個組內(nèi)隨機抽樣的方式取出8只小鼠并處死，然后取組織病理切片后，行蘇木素-伊紅（Hematoxylin and eosin，HE）及Masson染色，完成后鏡下比較模型的

3、組織切片肺泡炎性變化情況及纖維化程度；采用堿性水解法對小鼠的肺臟組織之中的羥脯氨酸（Hydroxyproline，Hyp）的含量進行檢測；采用免疫組化法對肺組織Ⅰ型膠原、磷酸化JNK及磷酸化Smad蛋白的含量進行測定，各組間測量數(shù)據(jù)進行對比。
　　結(jié)果：
　　在M組肺泡炎癥程度相對十分明顯出現(xiàn)在第7天這個時間點，在第28天這個時間點時肺臟的纖維化程度顯著；Hyp含量與時間呈正比例關(guān)系，當(dāng)?shù)?8天時Hyp的含量最高。模型組觀察

4、及檢測肺泡炎性改變的情況及纖維化程度結(jié)果顯示均比SB及SP組的明顯加重；第14、28天Hyp含量稍降低，Ⅰ型膠原蛋白、磷酸化的JNK蛋白及磷酸化的Smad蛋白的表達有所減少(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　JNK及Smad信號通路與肺纖維化的形成和發(fā)展緊密相關(guān)，且兩條途徑在轉(zhuǎn)化生長因子β1作用下誘導(dǎo)的ECM過度積聚過程之中發(fā)揮了重要的作用；JNK的活化會增加Smad3蛋白的磷酸化，而Smad信號通路的激活也反過來促進了JN