Th17細(xì)胞在肺纖維化小鼠中的動態(tài)表達(dá)及作用機(jī)制.pdf

1、目的:研究Th17細(xì)胞在博來霉素致肺纖維化小鼠中的動態(tài)表達(dá)及其作用機(jī)制，進(jìn)一步探討輔助性T細(xì)胞亞群與特發(fā)性肺纖維化的關(guān)系，并對特發(fā)性肺纖維化的發(fā)病機(jī)制有所完善。
　　方法:按照隨機(jī)數(shù)字表法將60只小鼠分為3組:對照組（A組）、博來霉素組（B組）和全反式維甲酸組（C組）。B、C兩組利用氣管內(nèi)一次性注入博來霉素(5 mg/kg，0.04ml)建立小鼠肺纖維化模型，A組則注入等體積的生理鹽水。C組小鼠在造模后的第0天每只腹腔注射全反式維

2、甲酸0.5mg，一周注射三次。三組小鼠在造模后的第3、7、14、28天分別各處死5只。通過HE及Masson染色評價(jià)小鼠肺組織的病理形態(tài)變化;檢測肺組織中羥脯氨酸(HYP)含量和RORγt mRNA的表達(dá)水平;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析小鼠脾臟中Th17細(xì)胞、Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的動態(tài)變化。
　　結(jié)果:(1)病理學(xué)變化:A組小鼠肺泡形態(tài)正常，未見明顯的炎性細(xì)胞浸潤，無膠原纖維增生。B組小鼠在造模后的第3、7天時(shí)肺組織以肺泡炎癥為主，第7

3、天可見少量膠原纖維增生;第14天炎癥有所減輕，部分肺泡融合，膠原纖維大量增生;第28天肺泡正常結(jié)構(gòu)消失，可見大量纖維化病灶。C3同B3，C組第7、14、28天肺泡炎、肺纖維化范圍及程度與同期B組相比，均有不同程度的緩解。
　　(2)與A組相比較，B、C兩組在第3、7、14及28天這四個(gè)時(shí)間點(diǎn)小鼠肺組織HYP含量逐漸升高，于第28天達(dá)最高值。其中B組第7、14、28天HYP含量都明顯高于同期A、C兩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05

4、）。
　　(3)在第3、7、14及28天四個(gè)時(shí)間點(diǎn)，A組RORγt mRNA表達(dá)水平均未見明顯變化。B組RORγt mRNA表達(dá)水平逐漸升高，于第14天達(dá)最高值，第28天有所下降，但仍高于同期A組(P＜0.05)。C組RORγt mRNA表達(dá)趨勢與B組相同，但表達(dá)水平都低于同期B組，高于同期A組（P＜0.05）。
　　(4)與A組相比較，B、C兩組Th17細(xì)胞和Th2細(xì)胞數(shù)在造模后逐漸上升，于第14天達(dá)最高值，第28天有所下

5、降，都明顯高于A組（P＜0.05）;而Th1細(xì)胞數(shù)逐漸下降，于第14天達(dá)最低值，第28天有所上升，都明顯低于A組（P＜0.05）。C組Th17和Th2細(xì)胞數(shù)在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)都低于同期B組，而Th1細(xì)胞數(shù)則高于同期B組（P＜0.05）。
　　結(jié)論:(1)在本次實(shí)驗(yàn)中，利用氣管內(nèi)注入博來霉素成功建立了小鼠肺纖維化的模型。
　　(2)在肺纖維化的過程中存在Th17/Th1/Th2細(xì)胞的失衡，Th17、Th2細(xì)胞表現(xiàn)為促纖維化作用，二者