氧化型高密度脂蛋白對血管平滑肌細胞增殖和遷移的影響及其機制的研究.pdf

1、目的:高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)是血漿中重要的抗動脈粥樣硬化物質(zhì)。但在系統(tǒng)性炎癥(包括動脈粥樣硬化)中,高密度脂蛋白可發(fā)生氧化修飾,形成氧化型高密度脂蛋白(oxidized high-density lipoprotein,ox-HDL)。ox-HDL失去了心血管保護作用,甚至成為促炎和促動脈粥樣硬化的因子。在動脈粥樣硬化斑塊形成過程中,血管平滑肌細胞(vascular smooth mus

2、cle cells,VSMCs)增殖和遷移起著重要的作用。然而,氧化型高密度脂蛋白對血管平滑肌細胞增殖和遷移的影響及其相關(guān)機制目前仍知之甚少。
　　方法:采用超速離心法分離新鮮血漿樣品中的HDL,并在體外由硫酸銅(CuSO4)介導氧化修飾而形成ox-HDL。大鼠主動脈VSMCs在適當?shù)沫h(huán)境下分離與培養(yǎng)。在多次實驗研究及分析中,未予特殊處理(氧化修飾)的正常HDL,即天然型高密度脂蛋白(native high-density lip

3、oprotein,N-HDL),和ox-HDL分別以不同的濃度和時間間隔處理VSMCs。細胞增殖由CCK-8(Cell counting kit-8)試劑盒來測定,細胞遷移由transwell小室和劃痕實驗來評估,而胞內(nèi)活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)由活性氧檢探針,即雙氫乙酰乙酸一二氯熒光黃(dihydrochloride acetyl acid dichloride fluorescent yell

4、ow,DCFH-DA)來測定。
　　結(jié)果:N-HDL對于VSMCs的增殖和遷移無作用;然而,ox-HDL卻明顯地以劑量依賴性方式促進VSMCs的增殖和遷移。此外,我們發(fā)現(xiàn)ox-HDL明顯地以時間依賴性方式促進VSMCs胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生,而N-HDL卻無此作用。N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-cysteine,NAC)為一種ROS清除劑,它能夠有效的抑制由ox-HDL誘導的VSMCs胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生,進而抑制ox-HDL的促增殖