心肌梗死病人中SIRT3基因啟動子遺傳和功能變異研究.pdf

1、目的:1）對心肌梗死病人和對照組人群的SIRT3基因啟動子序列進行遺傳學分析，找出SIRT3基因啟動子序列變異和心肌梗死之間的關(guān)系。
　　2)運用熒光素酶報告基因載體pGL3-Basic，檢測SIRT3基因啟動子序列變異的功能學變化。本研究擬為分子水平上預(yù)測心肌梗死發(fā)病風險提供理論基礎(chǔ)，并為心肌梗死的預(yù)防和治療靶點提供新的方向。
　　方法:采用大樣本和病例對照研究，其中MI病人319例，正常對照322例。采用PCR方法對SI

2、RT3基因啟動子序列進行擴增，直接DNA測序后進行分析，以發(fā)現(xiàn)心肌梗死病人和對照組人群中SIRT3基因啟動子的DNA序列變異情況。將SIRT3基因啟動子構(gòu)建入pMDR19-T載體進行擴增，然后再插入pGL3-Basic載體，與pRL-TK轉(zhuǎn)染H9c2細胞和HEK-293細胞，測量雙熒光素酶活性，通過對比分析DNA序列變異對SIRT3基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性的影響。
　　結(jié)果:本研究發(fā)現(xiàn)23個DNA序列變異(DSVs)，包括10個單核苷酸

3、多態(tài)性(SNPs)。我們在MI病人組中，發(fā)現(xiàn)6個為新穎雜合DSVs，g.237307A＞G，g.237270G＞A, g.237023_25del, g.236653C＞A, g.236628G＞C, g.236557T＞C,和兩個SNPs，g.237030C＞T(rs12293349)和g.237022C＞G(rs369344513)。但是，這些DNA序列變異在對照組中沒有發(fā)現(xiàn)。我們還發(fā)現(xiàn)三個SNPs，g.236473C＞T(rs11