小鼠精胺氧化酶基因SMO啟動子的結構和功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:多胺是一類廣泛存在于生物體內的小分子化合物,它與細胞的多種生命活動有關,細胞內多胺的聚集會加速細胞增殖分化甚至腫瘤的發(fā)生。臨床上應用多胺類似物進行腫瘤的治療已取得很好效果,為了進一步深入研究多胺代謝與腫瘤的關系,本課題重點研究多胺分解代謝途徑中關鍵酶之一精胺氧化酶的啟動子結構和功能。
　　方法:用Trizol試劑法從小鼠成纖維細胞中提取總 RNA,應用RNA連接酶介導的5`-RACE法獲得 mSMO的轉錄起始位點;巢式 PC

2、R方法克隆含有 mSMO啟動子的DNA序列,并由此構建5`端系列截短的mSMO啟動子熒光素酶的報告質粒;將報告質粒瞬時轉染 Cos7細胞后,用熒光素酶分析法測定啟動子活性。
　　結果:確定 mSMO基因至少有6個轉錄起始位點(+1,+4,+27,+31,+51,和+63),且均定位于外顯子1中。克隆獲得 mSMO基因轉錄起始位點上游大約2.1kb的DNA片斷,以此片段為基礎構建了11個5端系列截短的啟動子報告質粒。報告基因分析證實

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