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文檔簡介
1、目的:
肺癌是全球范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤。近年來發(fā)病率與死亡率不斷上升。肺癌可分為非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌,前者約占全部肺癌的85%。肺腺癌是非小細(xì)胞肺癌中最常見的組織學(xué)類型。大部分肺癌患者在診斷明確時已屬晚期,無法進(jìn)行肺癌根治性手術(shù),預(yù)后差。miRNA是一類小的內(nèi)生性的非編碼單鏈RNA分子,可以靶向作用于目標(biāo)mRNA,導(dǎo)致相應(yīng)基因的表達(dá)沉默。miRNA與腫瘤的研究深化了人們對腫瘤分子病理機制的理解。研究顯示miRNA調(diào)控著包
2、括肺癌在內(nèi)的多種腫瘤的產(chǎn)生與發(fā)展。肺癌中許多miRNA的表達(dá)發(fā)生異常,且某些miRNA的異常表達(dá)與疾病的診斷和預(yù)后密切相關(guān)。本課題旨在探究miR-206在人肺腺癌組織中的表達(dá)情況;分析其對肺腺癌細(xì)胞增殖、遷移的影響;并探討分子機制,為臨床上肺腺癌的診斷治療提供相關(guān)理論依據(jù)。
方法:
選取病理學(xué)診斷明確且術(shù)前未經(jīng)放化療的肺腺癌患者的癌組織和非癌肺組織,定量RT-PCR法分析二者間miR-206的表達(dá)量是否存在差異。選取
3、人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、PC9、HCC827。通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法上調(diào)miR-206的表達(dá)后,通過CCK8法、Transwell法檢測細(xì)胞增殖和遷移的變化。定量RT-PCR法、蛋白免疫印跡法分別檢測相關(guān)基因在mRNA及蛋白水平的表達(dá)變化。雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)行靶基因的鑒定。
結(jié)果:
miR-206在肺腺癌組織中的表達(dá)明顯低于非癌肺組織。轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-206的表達(dá)可顯著抑制肺腺癌細(xì)胞的增殖與遷移。蛋白檢測提示miR-2
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