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1、在PCR引物兩端加上合適的酶切位點(diǎn)后擴(kuò)增大鼠CuZnSOD cDNA,經(jīng)雙酶切后與表達(dá)載體pBV220連接,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,篩選出正確的重組質(zhì)粒pBV-RCS,經(jīng)質(zhì)粒穩(wěn)定性檢測(cè),證明該重組質(zhì)粒在宿主菌中能穩(wěn)定存在,加入一定濃度的金屬離子經(jīng)42℃誘導(dǎo)后,RCS得到了高表達(dá),薄層掃描測(cè)定表達(dá)蛋白占菌體總蛋白的49﹪,目前國(guó)內(nèi)外SOD表達(dá)菌株中,該菌株為高表達(dá)菌株.表達(dá)蛋白以包涵體形式存在于菌體內(nèi),用超聲波破壁后,經(jīng)透析復(fù)性和烯釋復(fù)性后
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