人參皂甙Rb1對(duì)人表皮黑素細(xì)胞黑素生長(zhǎng)的影響.pdf

1、目的:皮膚中黑素含量是決定皮膚顏色的主要因素之一。黑素細(xì)胞產(chǎn)生黑素,并將其輸送到周?chē)慕琴|(zhì)形成細(xì)胞,從而影響皮膚的顏色。黑素細(xì)胞生成黑素的不足可以導(dǎo)致皮膚色素減退或脫失,促進(jìn)黑素細(xì)胞的黑素生成是治療色素脫失性疾病的策略之一。酪氨酸酶是黑素細(xì)胞產(chǎn)生黑素的關(guān)鍵酶。近年研究發(fā)現(xiàn),酪氨酸酶主要受小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的調(diào)控,而MITF的表達(dá)又受到上游蛋白如cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)的影響。中藥人參曾被用于白癜風(fēng)等脫色素性疾病

2、的治療,而Rbl是中藥人參的主要有效成分之一。近年來(lái)有報(bào)道人參皂甙Rb1具有抗健忘、抗衰老、抗氧化、抗凋亡,促進(jìn)神經(jīng)纖維形成并保持其功能、等多重作用。黑素細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞在胚胎發(fā)生中同源,但人參皂甙Rb1對(duì)黑素細(xì)胞黑素生成的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。本文研究人參皂甙Rb1對(duì)人表皮黑素細(xì)胞黑素生成的影響及其作用機(jī)制,以探討其用于治療色素脫失性皮膚病的前景。
　　 方法:將黑素細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)、傳代,選取第2-5代黑素細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn),采用MTT法

3、測(cè)定細(xì)胞增殖情況,氧化多巴法測(cè)定酪氨酸酶活性,氫氧化鈉裂解法測(cè)定黑素生成,免疫蛋白印記法測(cè)定酪氨酸酶和小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)及cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)的激活。
　　 結(jié)果:加入25-100μg人參皂甙Rb1作用72h后,黑素細(xì)胞活力無(wú)明顯影響,細(xì)胞酪氨酸酶活性和黑素含量呈濃度依賴(lài)性增強(qiáng);100μM人參皂甙Rb1作用72h后,酪氨酸酶、MITF蛋白表達(dá)明顯增加,CREB明顯激活。10μM的蛋白激酶A(P