解毒活血法對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻大鼠炎癥細(xì)胞因子的影響.pdf

1、腎小管間質(zhì)纖維化(tubular interstitial fibrosis，TIF)幾乎是各種慢性腎臟疾病進(jìn)展為終末期腎衰竭的共同病變過(guò)程，以腎小管擴(kuò)張或萎縮、間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、成纖維細(xì)胞增殖、活化以及細(xì)胞外基質(zhì)(extra cellular matrix，ECM)沉積等為病理特征。炎癥反應(yīng)是TIF的始動(dòng)環(huán)節(jié)之一并貫穿其始終，有效抑制炎癥反應(yīng)對(duì)控制腎小管間質(zhì)纖維化的發(fā)生發(fā)展有著重要意義。
　　目的：本研究采用單側(cè)輸尿管梗阻(un

2、ilateral ureteral obstruction，UUO)的方法建立腎小管間質(zhì)纖維化模型，以纈沙坦為對(duì)照藥，通過(guò)觀察解毒活血法對(duì)大鼠腎臟組織病理形態(tài)學(xué)的改變，對(duì)血肌酐(serum creatinine，Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(tumour necrosis factor-α，TNF-α)及單核細(xì)胞趨化蛋

3、白-1(monoocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)的影響，探討其對(duì)UUO大鼠的保護(hù)作用及可能機(jī)制，為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：健康雌性Sprague Dawley(SD)大鼠50只，隨機(jī)分為假手術(shù)組，模型組，纈沙坦組，解毒活血低劑量組，解毒活血高劑量組，每組10只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。第8天，除假手術(shù)組，其余各組結(jié)扎左側(cè)輸尿管復(fù)制UUO模型。所有大鼠灌胃給藥，纈沙坦組給予26mg生藥/

4、kg·d；解毒活血低劑量組予12g生藥/kg·d；解毒活血高劑量組予24g生藥/kg·d，容量均為1ml/100g，假手術(shù)組和模型組予等容量生理鹽水，每日1次，共14天。所有大鼠于第22天斷頭處死，常規(guī)制備血清，檢測(cè)血肌酐和血尿素氮。切取左腎，制備腎組織勻漿，放射免疫法檢測(cè)IL-1β；行HE、Masson染色，觀察腎組織病理形態(tài)學(xué)改變，免疫組化法檢測(cè)TNF-α和MCP-1。
　　結(jié)果：
　　1各組大鼠的一般情況
　　假

5、手術(shù)組大鼠的被毛、飲食、精神狀態(tài)、活動(dòng)等無(wú)明顯改變。模型組大鼠的被毛蓬亂，飲食減少，精神萎靡，活動(dòng)減少。各治療組大鼠的一般情況均好于模型組。
　　2各組大鼠血肌酐、血尿素氮的檢測(cè)結(jié)果
　　模型組大鼠的血肌酐(117.090±14.521μmol/L)、血尿素氮(9.689±0.570mmol/L)較假手術(shù)組(61.118±12.492，7.485±0.354)顯著升高(P＜0.01)，纈沙坦組、解毒活血高、低劑量組的血肌酐(

6、95.218±15.805，81.914±9.598，83.863±8.716)、血尿素氮(8.832±0.289，8.374±0.297，8.573±0.344)較模型組均明顯降低(P＜0.01)。
　　3各組大鼠的腎組織病理形態(tài)學(xué)改變
　　HE染色顯示：假手術(shù)組的腎小管上皮細(xì)胞排列整齊，無(wú)明顯異常改變。模型組的腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死、脫落，腎小管擴(kuò)張，間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。纈沙坦組，解毒活血高、低劑量組的腎小管上皮細(xì)胞

7、變性、壞死及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度均比模型組減輕。
　　Masson染色顯示：假手術(shù)組的間質(zhì)有少量膠原成分的表達(dá)。模型組間質(zhì)可見(jiàn)大量膠原沉積。纈沙坦組，解毒活血高、低劑量組的膠原沉積均比模型組顯著減少。
　　4各組大鼠腎組織TNF-α的免疫組化檢測(cè)結(jié)果
　　假手術(shù)組的腎小管上皮細(xì)胞有少量TNF-α的表達(dá)，呈淺黃色。與假手術(shù)組相比，模型組表達(dá)顯著增多，呈棕黃色。與模型組相比，纈沙坦組TNF-α的表達(dá)減少，呈淺黃色。解毒活血高、

8、低劑量組均比模型組明顯減少，呈淺黃色。
　　5各組大鼠腎組織MCP-1的免疫組化檢測(cè)結(jié)果
　　假手術(shù)組有極少量MCP-1的表達(dá)。與假手術(shù)組相比，模型組表達(dá)顯著增多，主要見(jiàn)于腎小管上皮細(xì)胞，呈棕黃色。與模型組相比，纈沙坦組MCP-1的表達(dá)減少，呈淺黃色。解毒活血高、低劑量組均比模型組明顯減少。
　　6各組大鼠腎組織IL-1β放射免疫法的檢測(cè)結(jié)果
　　模型組大鼠腎組織的IL-1β(144.510±14.462pg/m

9、l)表達(dá)水平較假手術(shù)組(107.640±14.657)顯著升高(P＜0.01)，纈沙坦組(130.590±9.803)、解毒活血低劑量組(127.420±11.274)較模型組均明顯降低(P＜0.05)，解毒活血高劑量組(124.580±12.060)較模型組顯著降低(P＜0.01)。
　　結(jié)論：
　　1解毒活血方藥具有顯著減輕腎小管間質(zhì)纖維化大鼠腎組織結(jié)構(gòu)的損傷，改善腎功能的作用。從實(shí)驗(yàn)角度證實(shí)解毒活血方藥能明顯減輕腎小管