中介素對大鼠單側(cè)輸尿管梗阻腎間質(zhì)纖維化的影響.pdf

1、目的：以大鼠單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)為腎間質(zhì)纖維化模型，觀察中介素(IMD)對大鼠UUO模型腎間質(zhì)纖維化的影響。
　　 方法：(1)雄性Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為假手術(shù)組10只，行左輸尿管分離術(shù)；另30只行左輸尿管結(jié)扎術(shù)，術(shù)后隨機(jī)分為：模型組(UUO)、氯沙坦組、IMD組(每組n=10)。①氯沙坦組：術(shù)后當(dāng)天將氯沙坦鉀片溶于生理鹽水，制成混懸液，20mg/(kg-d)，灌胃，直至處死；②IMD組：在無菌條件下，將IMD8_

2、47溶于200ul生理鹽水后注入微量滲透泵，于大鼠背脊部皮下作一長約1cm橫切口，將泵植入，泵開口朝向鼠背前方，持續(xù)皮下給藥，劑量為100ng/(kg·h)，確保泵在皮下活動(dòng)度好。③假手術(shù)組、模型組術(shù)后當(dāng)天給予等體積生理鹽水，灌胃。(2)各組大鼠分別于術(shù)后第14、21天隨機(jī)選取5只，腹主動(dòng)脈采血并留取梗阻側(cè)腎組織，之后處死。HE、Masson染色觀察腎組織病理變化；比色法測定血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及新鮮腎組織羥脯氨酸(Pro)

3、含量；免疫組化方法檢測梗阻側(cè)腎組織中轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、IMD的表達(dá)水平，并進(jìn)行半定量分析。
　　 結(jié)果：(1)腎臟的病理改變：光鏡下觀察，HE和Masson染色顯示，假手術(shù)組大鼠腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)基本正常；UUO組大鼠腎小管上皮細(xì)胞腫脹、空泡變性，腎小管萎縮、管腔閉塞或擴(kuò)張，彌漫的單核、淋巴細(xì)胞浸潤，間質(zhì)增寬，成纖維細(xì)胞增生，膠原纖維增多、纖維化形成。與UUO組相比，氯沙坦組及IMD組腎小管損害、間質(zhì)纖維化程度

4、均減輕。(2)血BUN、Scr、腎組織Pro含量：與假手術(shù)組相比，不同時(shí)間點(diǎn)UUO組大鼠血BUN、Cr、Pro含量顯著升高(P＜0.01)；與UUO組相比較，氯沙坦組和IMD組血BUN、Cr、Pro含量均降低（P＜0.05）。氯沙坦組與IMD組相比腎功能明顯改善，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)免疫組化染色結(jié)果：①TGF-β1免疫組化染色結(jié)果顯示，各時(shí)間點(diǎn)，假手術(shù)組腎間質(zhì)可見有微量TGF-β1表達(dá)，UUO組見強(qiáng)陽性TGF-β1表達(dá)；與UUO組

5、相比，氯沙坦組和IMD組TGF-β1陽性染色面積百分比減少；IMD組較氯沙坦組陽性染色面積減少，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。②IMD免疫組化染色結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，其余三組在腎間質(zhì)、腎小管周圍可見IMD陽性信號（P＜0.05）；氯沙坦組IMD陽性染色面積百分比較UUO組減少(P＜0.01)；與UUO組相比，IMD組腎組織IMD陽性表達(dá)明顯升高(P＜0.05)；IMD組IMD表達(dá)較氯沙坦組明顯增加(P＜0.05)。