Tbx3對ES細胞分化及端粒延長機制的初步探討.pdf

1、Tbx3基因是T-box(Tbx)基因家族的成員之一，這一家族屬于發(fā)育調(diào)控相關轉(zhuǎn)錄因子基因家族，早期即在胚胎的肢芽邊緣表達，參與細胞信號的傳導，從而影響機體的發(fā)育和穩(wěn)定，尤其在胚胎發(fā)育時期，對于四肢和乳腺的發(fā)育尤其重要。Tbx3和Tbx2還在機體的復制性衰老及腫瘤的發(fā)生中發(fā)揮作用。最近Nature一篇報道說在重編程多能干細胞時，加入Tbx3轉(zhuǎn)錄因子，可以提高獲得嵌合體的效率，但是具體的機制并不清楚。推測可能有兩種機制：一方面Tbx3通過

2、提高ES細胞多能性而實現(xiàn)，因為有報道Tbx3可以在沒有Lif因子存在的情況下，通過調(diào)控Nanog維持細胞的多能性，并且也有研究表明Nanog是生殖細胞形成及存活所必需的，所以可能的模式是Tbx3通過調(diào)控Nanog調(diào)控生殖系轉(zhuǎn)移：另一方面Tbx3可能通過影響ES細胞的分化方向使其更容易向生殖細胞分化而實現(xiàn)，因為Tbx3對早期胚胎發(fā)育具有重要且廣泛的調(diào)控作用，所以設計實驗在ES細胞里過表達Tbx3，通過定量和免疫熒光檢測過表達細胞系的多能性

3、基因的表達情況，另外通過體內(nèi)注射和體外分化實驗驗證我們的假設。結果顯示過表達Tbx3后ES細胞的多能性基因并沒有顯著變化，體外EB分化和畸胎瘤注射也能向三胚層分化，但是當分化8天時，意外發(fā)現(xiàn)過表達Tbx3細胞系有極微弱或沒有心肌跳動，并且繼續(xù)分化11天時也沒有出現(xiàn)，檢測心肌marker(MHC，Myocardial，Nkx2.5)發(fā)現(xiàn)也沒有表達或表達很低，這表明Tbx3可以影響ES細胞向心肌分化。同時也首次發(fā)現(xiàn)Tbx3可以引起端粒的延長