粉防已堿下調(diào)NF-κB和iNOS、抑制哮喘小鼠氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性的研究.pdf

1、目的:
　　(1)研究在雞卵白蛋白(OVA)致敏激發(fā)的哮喘小鼠模型上，粉防己堿（Tetrandrine，Tet）能否抑制哮喘小鼠氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性;
　　(2)研究粉防己堿對哮喘小鼠的作用是否通過下調(diào)核因子κB(NF-κB)經(jīng)典途徑，進而抑制誘導型一氧化氮合酶(iNOS)及促炎細胞因子白介素4(IL-4)、IL-13等產(chǎn)生。
　　方法:
　　將36只BALBM小鼠隨機分6組:正常組（N組）、哮喘組（OVA組）

2、、地塞米松組（Dex組）、粉防己堿高劑量組（TH組）、低劑量組（TL組），和溶劑對照組（HCl組），每組6只。OVA、Dex、TH、TL和HCl五組于第0天、7天和14天腹腔注射OVA溶液200μl(含OVA100μg和氫氧化鋁4 mg)，第21天開始用5％OVA霧化液霧化，每次30 min，連續(xù)5天，激發(fā)小鼠哮喘發(fā)作。Dex、TH、TL和HCl四組于OVA溶液霧化前30 min，分別腹腔注射地塞米松（1 mg/kg）、粉防己堿(各為5

3、0 mg/kg和25 mg/kg)及HCl溶液(pH6.5～7.0)各200μL。N組以等量磷酸鹽緩沖液(PBS)代替OVA腹腔注射及霧化吸入。末次激發(fā)24 h后，肺功能儀測定小鼠氣道阻力;蘇木素-伊紅(HE)染色觀察氣道炎癥細胞浸潤;酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清總IgE、OVA特異性IgE(OVA-sIgE)及支氣管肺泡灌洗液(BALF)中Th2細胞因子IL-4和IL-13水平;顯微鏡下計BALF中細胞總數(shù)，瑞氏染色計嗜酸粒

4、細胞分類計數(shù);Western blot檢測肺組織NF-κB通路蛋白（磷酸化p65，胞漿、核p65蛋白）和iNOS蛋白表達水平。
　　結(jié)果:
　　(1)氣道阻力:隨氯化乙酰膽堿(Ach)濃度增加，N組小鼠氣道阻力僅輕度增加，OVA和HCl組氣道阻力較N組顯著增高，Dex和TH組氣道阻力較OVA組顯著下降(P＜0.05)。
　　(2)HE染色:OVA和HCl組小鼠氣道黏膜明顯腫脹，黏液腺增生，黏膜皺襞增多，氣道上皮細胞變性

5、、壞死、脫落，氣道黏膜層、黏膜下層及血管周圍組織可見大量以嗜酸粒細胞為主的炎性細胞浸潤。Dex和TH組炎癥浸潤程度較OVA組顯著減輕(P＜0.05)。
　　(3)ELI SA: OVA和HCl組血清總IgE和OVA-sIgE、Th2細胞因子IL-4和IL-13均較N組顯著增高，Dex和TH組上述炎癥指標均較OVA組顯著降低(P＜0.05)。
　　(4)細胞計數(shù):OVA和HCl組BALF沉渣中炎癥細胞總數(shù)和嗜酸粒細胞分類計數(shù)均

6、較N組顯著增高，Dex和TH組炎癥細胞計數(shù)均較OVA組顯著降低(P＜0.05);
　　(5)Western Blot: OVA和HCl組肺組織磷酸化p65、核p65和iNOS蛋白表達水平較N組顯著增高，IκBα和胞漿p65蛋白表達水平較N組顯著下降，Dex和TH組肺組織磷酸化p65、核p65和iNOS蛋白表達水平較OVA組顯著下降，IκBα和胞漿p65蛋白表達水平較OVA組顯著增高(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
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