苦參堿和纈沙坦對哮喘小鼠早期氣道重構(gòu)和炎癥的影響.pdf

1、目的：觀察應(yīng)用苦參堿和纈沙坦對支氣管哮喘(簡稱哮喘)小鼠氣道炎癥和氣道重構(gòu)的防治作用及探究其可能的機(jī)制。 方法：60只小鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，空白對照組(A組)、哮喘模型組(B組)、地塞米松組(2mg/kg C組)、苦參堿高劑量組(50mg/kg，D組)、低劑量組(25 mg/kg，E組)和纈沙坦組(60mg/kg，F(xiàn)組)，后五組為實(shí)驗(yàn)組，以卵蛋白致敏激發(fā)建立慢性哮喘模型并按組分別給予不同藥物。對肺組織切片行蘇木精-伊紅(

2、HE)、過碘酸雪夫(PAS)、Masson三色染色，定量杯狀細(xì)胞百分比及黏液分泌和炎癥細(xì)胞評分，并測定支氣管基底膜周徑(Pbm)、平滑肌面積、基底膜膠原面積，用Pbm標(biāo)準(zhǔn)化。以免疫組織化學(xué)和RT-PCR技術(shù)檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)和結(jié)締組織生長因子(CTGF)的定位及表達(dá)水平。比較各組小鼠氣道炎癥和重構(gòu)的程度與TGF-β1和CTGF含量的關(guān)系。結(jié)果①A組和B組炎癥細(xì)胞評分分別為0.58分、3.00分，黏液分泌評分分別為0.

3、75分、3.80分，杯狀細(xì)胞比占上皮細(xì)胞百分比分別為(1.67±0.49)％、(54.70±15.45)％，平滑肌面積分別為(11.47±2.06)/μm2/μm、(30.02±3.33)μm2/μm，膠原沉積面積分別為(3.87±1.80)μm2/μm、(24.43±6.07)μm2/μm兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01.)。C、D、E、F組炎癥細(xì)胞評分分別為1.08分、1.50分、2.18分、1.68分，黏液分泌評分分別為

4、1.08分、1.91分、2.09分、1.91分，杯狀細(xì)胞比占上皮細(xì)胞百分比為(20.40±_5.92)％、(31.71±7.60)％、(36.22±10.82)％、(40.73±8.63)％，平滑肌面積為(15.20±3.08)μm2/μm、(22.16±4.80)μm2/μm、(26.49±3.35)μm2/μm、 (17.47±3.43)μm2/μm，膠原沉積面積為 (15.35±3.53)μm2/μm、(16.62±5.98)μm

5、2/μm、(17.47±4.42)μm2/μm、 (14.03±4.60)μm2/μm,各組與B組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)；②RT-PCR半定量檢測肺組織TGF-β1和CTGF mRNA的水平，A組灰度值分別為160.33±25.38、86.00±8.46，B組灰度值.分別為246.67±37.09、160.00±24.32，A、B兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)。C、D、E、F組TGF-β1擴(kuò)增條帶灰度值分

6、別為173.67±23.00、194.56±24.73、207.44±41.95、172.33±22.03，各給藥組與B組比較有差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)，CTGF擴(kuò)增條帶灰度值分別為94.11±9.66、92.67±14.03、104.11±10.28、99.22±6.22，各給藥組與B組比較有差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)，各給藥組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；免疫組織化學(xué)半定量檢測肺組織切片TGF-β1和CT

7、GF的胞漿表達(dá)，A組光密度值分別為21.17±5.13和15.24±3.62，B組光密度值分別為36.39±8.21、27.39±4.88，A、B兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；C、D、F組TGF-β1表達(dá)的光密度值分別為26.29±4.86、25.84±4.89、23.79±4.31，與B組比較有顯著差異(P均<0.01)，E組為26.31±5.25，與B組比較有差異(P<0.05)；CTGF表達(dá)的光密度值分別為21.27

8、±4.40、21.92±3.33、22.64±4.38、21.51±3.06，各給藥組與B組比較有差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P均<0.01)，各給藥組聞TGF-β1和CTGF的表達(dá)無顯著(P>0.05)。各組小鼠TGF-β1和CTGF胞漿表達(dá)水平與平滑肌面積和膠原面積呈正相關(guān)(r分別為0.435、0.583、0.522、0.590，P<0.01)結(jié)論苦參堿及纈沙坦能夠抑制哮喘的氣道炎癥和氣道重構(gòu)，其抑制氣道重構(gòu)的可能機(jī)制為影響TGF-β1到