盾葉薯蕷總皂苷提取及微生物轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、盾葉薯蕷，又名黃姜，是我國特有的植物資源，利用盾葉薯蕷生產(chǎn)的薯蕷皂苷元是重要的藥物原料。目前，工業(yè)上傳統(tǒng)的生產(chǎn)薯蕷皂苷元的方法為酸解法。由于酸水解方法對(duì)于環(huán)境的污染極其嚴(yán)重，因此，尋找綠色清潔的生產(chǎn)薯蕷皂苷元的方法顯得尤為重要。本研究通過前期篩選出的能轉(zhuǎn)化盾葉薯蕷皂苷生產(chǎn)薯蕷皂苷元的微生物，對(duì)高效提取盾葉薯蕷總皂苷并清潔轉(zhuǎn)化生產(chǎn)薯蕷皂苷元工藝開展研究，主要研究結(jié)果如下：
　?。?）建立了超聲輔助提取盾葉薯蕷總皂苷的工藝。首先，建立

2、了利用高氯酸顯色法測定盾葉薯蕷總皂苷含量的方法，該方法可快速準(zhǔn)確測定盾葉薯蕷中總皂苷含量。同時(shí)，研究確定了超聲提取總皂苷最佳工藝為：乙醇體積分?jǐn)?shù)70％，料液比1:15，超聲功率為200w，超聲提取30min，在該提取條件下，每克盾葉薯蕷干粉可以提取出23±0.3mg的總皂苷。
　?。?）建立并優(yōu)化了塔賓曲霉轉(zhuǎn)化總皂苷生產(chǎn)皂苷元的發(fā)酵條件。針對(duì)塔賓曲霉轉(zhuǎn)化總皂苷的發(fā)酵參數(shù)開展研究，確定最佳轉(zhuǎn)化條件為：接種量10%，底物濃度2g/L，

3、初始pH6.0，轉(zhuǎn)化溫度37℃。采用優(yōu)化后的條件進(jìn)行總皂苷的轉(zhuǎn)化，薯蕷皂苷元的產(chǎn)量可達(dá)到19.1±0.3mg/g盾葉薯蕷干粉，總皂苷轉(zhuǎn)化率達(dá)到80%。
　?。?）通過胞外葡萄糖苷酶的催化性質(zhì)研究，進(jìn)一步優(yōu)化了塔賓曲霉轉(zhuǎn)化皂苷的條件，提高了總皂苷的轉(zhuǎn)化率。通過研究該葡萄糖苷酶的催化特性，發(fā)現(xiàn)該酶的最適溫度是50℃，最適pH值是6.0，Mg2+的添加可提高30%的酶活力。根據(jù)該酶以上催化特性，在塔賓曲霉轉(zhuǎn)化總皂苷的后期，提高溫度至50