靶向半胱氨酸組織蛋白酶家族的溶酶體探針的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、溶酶體在細胞各種生命活動,包括物質(zhì)代謝、細胞膜循環(huán)、細胞凋亡中發(fā)揮著重要作用,如果它發(fā)生功能紊亂,會造成諸如腫瘤、炎癥、矽肺等多種疾病的產(chǎn)生。實現(xiàn)對溶酶體的標記,直觀地檢測物質(zhì)在溶酶體的定位改變,不僅能夠幫助理解溶酶體參與生命活動的分子機制,而且對疾病的治療具有重要的指導(dǎo)意義。
　　本課題利用基于活性組織蛋白酶家族的透膜小分子探針(CpFABPs),結(jié)合活性組織蛋白酶家族位于溶酶體的特點,發(fā)展CpFABPs成為一種新型的溶酶體標記

2、探針。
　　以LysoTracker熒光探針為標準物,經(jīng)過共定位分析,課題證實CpFABPs在不同的細胞系都能實現(xiàn)對溶酶體的標記,而且即使轉(zhuǎn)變CpFABPs的熒光基團,這種標記也幾乎不受影響。在細胞裂解液和活細胞水平,通過直接標記或抑制劑的競爭性標記分析,本文確認CpFABPs標記溶酶體的機制在于其對活性組織蛋白酶家族的特異性標記作用。CpFABPs共價結(jié)合組織蛋白酶的作用不易被破壞,因此其被成功地應(yīng)用于固定細胞、透化細胞和氯化銨

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