版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、水稻是我國(guó)最為重要的糧食作物,水稻產(chǎn)量的穩(wěn)定對(duì)我國(guó)農(nóng)業(yè)有著重大意義。稻縱卷葉螟是我國(guó)危害最為嚴(yán)重的水稻害蟲之一,一直是我國(guó)水稻害蟲防治的重要對(duì)象,然而大量施用化學(xué)農(nóng)藥除了對(duì)環(huán)境造成污染外,對(duì)食用者健康也存在著潛在的危害。由于幾丁質(zhì)是昆蟲體內(nèi)重要的組成部分,它是構(gòu)成昆蟲頭殼,外骨骼,氣管,圍食膜等器官的重要結(jié)構(gòu)組分,并且它并不存在于高級(jí)動(dòng)植物體內(nèi),所以近年來,對(duì)昆蟲的幾丁質(zhì)合成和代謝過程的研究逐漸成為害蟲防治的熱點(diǎn),具有重大的研究?jī)r(jià)值。幾
2、丁質(zhì)在生物體內(nèi)的合成是一個(gè)復(fù)雜的過程,涉及到多種酶的互相作用。
幾丁質(zhì)的合成從N-acetyl-glucosamine-6-phosphate開始,相繼經(jīng)N-乙酰葡糖胺磷酸變位酶Phosphoacetylglucosamine Mutase(PGM)和UDP-N-乙酰葡萄糖焦磷酸化酶UDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylase(UAP)的催化,得到UDP-N-acetylglucosami
3、ne,而幾丁質(zhì)合成酶Chitin Synthase(CHS)將UDP-N--acetylglucosamine催化得到幾丁質(zhì),昆蟲中的幾丁質(zhì)合成酶又可分為兩類,幾丁質(zhì)合成酶A(CHSA)和幾丁質(zhì)合成酶B(CHSB)。為闡明幾丁質(zhì)合成酶(CHS)及另外兩個(gè)合成通路上關(guān)鍵酶(PGM, UAP)的作用,本研究開展了對(duì)稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶及合成相關(guān)通路上關(guān)鍵酶的克隆及時(shí)空表達(dá)分析。
本研究以水稻害蟲稻縱卷葉螟為研究對(duì)象,基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)
4、據(jù),結(jié)合 PCR及RACE技術(shù)獲得了幾丁質(zhì)合成酶代謝通路上的4條基因的 cDNA全長(zhǎng);對(duì)這4種酶的氨基酸序列進(jìn)行結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)、序列比對(duì)和進(jìn)化分析;采用熒光定量 PCR技術(shù)研究了這4個(gè)基因在不同蟲態(tài)和幼蟲的不同組織中的表達(dá)情況。獲得結(jié)果如下:
首次獲得稻縱卷葉螟2條幾丁質(zhì)合成酶序列及2條合成通路上的基因的含有完整編碼框的cDNA序列,包括幾丁質(zhì)合成酶A(Chitin Synthase A,CHSA),幾丁質(zhì)合成酶B(Chitin S
5、ynthase B,CHSB),N-乙酰葡糖胺磷酸變位酶(Phosphoacetyl-glucosamine Mutase,PGM)和 UDP-N-乙酰葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-N- acetyl-glucosamine pyrophosphorylase,UAP),并分別命名為 CmCHSA,CmCHSB, CmPGM和CmUAP;序列分析顯示CmCHSA序列為4868bp,含完整編碼框,編碼1564個(gè)氨基酸。CmCHSB序列為465
6、1bp,含完整編碼框,編碼1525個(gè)氨基酸。CmPGM序列為1934bp,含完整編碼框,編碼548個(gè)氨基酸。CmUAP序列為1837bp,含完整編碼框,編碼487個(gè)氨基酸。
對(duì)這些基因序列所推導(dǎo)出的蛋白質(zhì)序列結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行分析,表明這些蛋白序列分別具有昆蟲CHSA,CHSB,PGM和UAP的特征。其中CmCHSA與CmCHSB氨基酸相似性較高,并且都含有幾丁質(zhì)合成酶共有的保守基序,這些基序在催化過程中發(fā)揮著重要作用。不同物種CH
7、SA之間的氨基酸序列相似度高于CHSB之間的氨基酸相似度,產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因可能與它們的功能有關(guān)。
通過4個(gè)基因的時(shí)空表達(dá)分析明確了這4個(gè)基因的組織表達(dá)特性,同時(shí)也了解了這4個(gè)基因在不同蟲態(tài)中的表達(dá)情況。CmCHSA主要在頭部和表皮中表達(dá),在其它組織中表達(dá)量較少,成蟲的表達(dá)量比幼蟲稍高。CmCHSB主要在中腸中表達(dá),在脂肪體中也有表達(dá),成蟲的表達(dá)量比幼蟲稍高。CmPGM和CmUAP主要在血淋巴中表達(dá),且成蟲的表達(dá)量遠(yuǎn)高于幼蟲。
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 稻縱卷葉螟保幼激素合成通路相關(guān)基因克隆及時(shí)空表達(dá)分析.pdf
- 利用RNA干擾技術(shù)沉默稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因.pdf
- 幾丁質(zhì)酶產(chǎn)生菌的篩選鑒定及幾丁質(zhì)裂解酶基因的克隆與表達(dá).pdf
- 家蠶表皮型幾丁質(zhì)合成酶基因的克隆及表達(dá)分析.pdf
- 家蠶幾丁質(zhì)酶與幾丁質(zhì)合成酶的基因表達(dá)與功能研究.pdf
- 稻縱卷葉螟轉(zhuǎn)錄組及幾丁質(zhì)代謝途徑和抗藥性基因鑒定.pdf
- 660.日本沼蝦表皮幾丁質(zhì)合成酶基因的克隆及表達(dá)分析
- 棘孢木霉菌幾丁質(zhì)酶基因的克隆表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)分析.pdf
- 甜菜夜蛾幾丁質(zhì)合成酶基因的克隆和表達(dá)研究.pdf
- 小擬南芥幾丁質(zhì)酶基因的克隆、序列分析及原核表達(dá).pdf
- 興安落葉松幾丁質(zhì)酶基因的克隆及表達(dá)特性分析.pdf
- 暗黑鰓金龜幾丁質(zhì)酶基因hpChi的克隆、表達(dá)及活性分析.pdf
- 注射dsRNA干擾甜菜夜蛾幾丁質(zhì)合成酶基因的表達(dá).pdf
- Bt幾丁質(zhì)酶表達(dá)類型的檢測(cè)及基因克隆和序列分析.pdf
- 人參CLASSⅢ幾丁質(zhì)酶基因克隆、序列分析及原核表達(dá).pdf
- isoptericolajiangsuensissp.nov.的分離、鑒定及其幾丁質(zhì)酶基因的克隆與表達(dá)
- 甘蔗幾丁質(zhì)酶家族基因的克隆與鑒定.pdf
- 甜菜夜蛾幾丁質(zhì)合成酶的表達(dá)及初步純化.pdf
- 2289.黃翅大白蟻幾丁質(zhì)酶基因鑒定及功能性表達(dá)
- 一株產(chǎn)幾丁質(zhì)酶細(xì)菌的鑒定、酶的性質(zhì)及其基因的克隆與表達(dá).pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論