α-乙酰乳酸脫羧酶的定向進(jìn)化及低溫條件下高活力突變酶的篩選.pdf_第1頁(yè)
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1、酶的體外定向進(jìn)化是蛋白質(zhì)工程的新策略.它不需要事先了解酶的空間結(jié)構(gòu)和催化機(jī)制,而通過在體外模擬自然進(jìn)化機(jī)制(隨機(jī)突變,重組和自然選擇),利用易錯(cuò)PCR,DNA改組,交錯(cuò)延伸等方法,改造酶基因,定向選擇(或篩選)有價(jià)值的非天然酶,短期內(nèi)在試管中完成在自然界需要幾百萬年的進(jìn)化過程. 根據(jù)定向進(jìn)化的基本思想,我們利用易錯(cuò)PCR的方法,篩選了近7000個(gè)菌落,最終得到了一株在低溫下也有較高酶活力的突變體.15℃條件下,突變酶的活力比天然酶高了2

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