衣原體呼吸道感染中Th17與Treg應答水平及相互調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、目的：
　　 檢測沙眼衣原體小鼠肺炎菌株(Cm)呼吸道感染小鼠中Th17與Treg細胞的應答水平：探討Th17和Treg細胞在Cm呼吸道感染中的作用及Th17與Treg細胞間的相互調(diào)節(jié)。
　　 方法：
　　 取6-8周雌性C57BL/6小鼠，鼻腔吸入40ul含1×103IFU的Cm，建立Cm感染小鼠肺炎模型。通過觀察Cm感染后小鼠體重變化、死亡率、肺組織Cm繁殖情況及肺病理學變化以確定小鼠感染Cm后的疾病狀態(tài)；在

2、感染后不同天數(shù)處死小鼠，制備脾細胞懸液，采用流式細胞術檢測Th17和Treg百分率；分離肺組織，利用RT-PCR技術檢測感染小鼠肺組織Th17和Treg的轉(zhuǎn)錄因子ROR-γt、FoxP3及相關細胞因子IL-17、TGF-β mRNA表達，探討Cm感染小鼠Th17與Treg細胞的免疫應答水平。利用單克隆抗體體內(nèi)中和技術分別中和Cm感染小鼠體內(nèi)的IL-17與CD25，在感染后第7天處死小鼠，利用流式細胞術檢測Treg及Th17細胞的應答，利

3、用RT-PCR技術檢測IL-17和CD25中和小鼠肺組織FoxP3、TGF-β及ROR-γt、IL-17 mRNA的表達，以探討Th17和Treg在Cm感染中的作用及兩者間的相互調(diào)節(jié)。
　　 結果：
　　 小鼠鼻腔吸入Cm誘導現(xiàn)典型的衣原體肺炎：小鼠體重下降、肺組織衣原體繁殖及大量炎癥細胞浸潤。Cm呼吸道感染可誘導小鼠在感染肺組織及脾臟產(chǎn)生高水平的Th17和Treg應答，以脾臟Th17與Treg細胞顯著擴增；肺組織ROR

4、-γt、FOXp3及其相關細胞因子IL-17和TGF-β mRNA表達增高為特征。內(nèi)源性IL-17中和，小鼠呈現(xiàn)嚴重的疾病狀態(tài)；與給予PBS的對照組小鼠相比，內(nèi)源性IL-17中和小鼠脾臟Treg百分率及肺組織FOXp3、TGF-β mRNA的表達均無明顯變化。與給予PBS的對照組小鼠比較，內(nèi)源性CD25中和小鼠亦顯示嚴重的疾病狀態(tài)，但脾臟Th17百分率及肺組織ROR-γt、IL-17 mRNA表達均無明顯變化。
　　 結論：