人中黃的質(zhì)量控制及其體外抑菌、抗流感病毒(H1N1)的研究.pdf

1、人中黃為甘草（Glycyrrhiza uralensisFisch）的特殊炮制品，其性味甘、咸、寒，具有清熱涼血、瀉火解毒的功效。目前國內(nèi)外對甘草的物質(zhì)基礎(chǔ)研究報道比較多，而有關(guān)人中黃的研究報道則甚少。人中黃屬于清熱解毒類藥物，該類藥物一般具有抑菌、抗炎、抗病毒等藥理作用。古籍文獻中常有人中黃治療瘟疫的記載，且效果顯著。由于人中黃獨特的炮制加工方法，在現(xiàn)代，人們出于對藥物安全和衛(wèi)生方面的考慮，人中黃有逐漸被淘汰的趨勢。為了挖掘中醫(yī)藥偉大

2、的寶庫，去粗取精，有必要對人中黃進行較系統(tǒng)的研究。本文建立了人中黃的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對人中黃進行了藥材性狀、鑒別、檢查、指紋圖譜和含量測定研究，同時對其體外抑菌、抗流感病毒進行了初步研究。
　　采用顯微鑒別法觀察了人中黃的粉末顯微特征，發(fā)現(xiàn)人中黃的粉末顯微特征與甘草的顯微特征相似，并檢出2批摻偽藥材；采用薄層色譜法，以甘草苷、甘草酸、甘草素為對照物，建立的TLC鑒別方法結(jié)果理想。按照水分測定法(《中國藥典》2015年版四部通則0832第

3、二法(烘干法))測定了10批人中黃藥材的水分，結(jié)果顯示，人中黃樣品水分均不超過
　　9.0％。對人中黃微生物限度檢查方法進行了驗證，并參照控制菌檢查法（《中國藥典》2015版四部通則1106）實驗，結(jié)果3批人中黃中均未檢查出大腸埃希菌和耐膽鹽格蘭陰性菌。
　　參照CFDA頒布《中藥注射劑指紋圖譜的技術(shù)要求(暫行)》的規(guī)定，采用HPLC法建立了人中黃的指紋圖譜，標(biāo)定了17個共有峰，共有峰均在90min內(nèi)出現(xiàn)，各色譜峰分離度較好

4、，結(jié)果顯示其中10批樣品與對照圖譜相比，相似度均達到0.9，另檢出2批市售品與對照圖譜差異明顯，顯微鑒別證明為摻偽品，兩種方法鑒別的結(jié)果相吻合。
　　采用HPLC法，以甘草苷、甘草素及甘草酸為指標(biāo)成分，建立了人中黃含量測定方法。結(jié)果：各色譜峰分離情況良好，甘草苷、甘草素和甘草酸在各自的濃度范圍內(nèi)均有良好的線性關(guān)系；加樣回收率在97.49%-103.24%之間，其RSD為0.58%-1.24%之間。結(jié)論：所建方法準(zhǔn)確、簡便、重現(xiàn)性好

5、，可用于人中黃中甘草苷、甘草素和甘草酸的定量考察。
　　采用用紙片擴散法和二倍稀釋法，發(fā)現(xiàn)人中黃及甘草對大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌均有一定的抑制作用。人中黃和甘草均對金黃色葡萄球菌有較顯著的抑菌和殺菌效果,MIC均為0.016g/ml, MBC均為0.031g/ml，對綠膿桿菌和大腸桿菌抑制作用較弱。此外，人中黃對白色念珠菌的MIC為0.250g/ml，甘草對白色念珠菌的MIC大于0.500g/ml，表明人中黃

6、抑制白色念珠菌作用強于甘草。
　　采用MTT法對人中黃及其不同極性提取物的體外抗H1N1流感病毒的活性進行了初步研究。結(jié)果顯示，人中黃總提取物、甘草總提取物、正丁醇部位、水部位和利巴韋林組（陽性對照組）均有抗流感病毒生物合成作用，其治療指數(shù)(TI)分別為5.16±0.24、2.41±0.11、7.54±0.38、49.52±2.31、6.88±0.36；其中水部位抗病毒生物合成作用最強，甘草總部位抗生物合成作用最弱，且水部位和正丁