人巨細(xì)胞病毒先天性感染與非先天性感染對(duì)子代大鼠學(xué)習(xí)記憶影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立先天性及非先天性人巨細(xì)胞病毒感染的SD大鼠模型，研究大鼠先天性與非先天性人巨細(xì)胞病毒（Human cytomegalovirus,HCMV）感染對(duì)子代大鼠海馬NMDA受體NR1、NR2B亞基表達(dá)及學(xué)習(xí)記憶能力的影響，從而探討臨床防治巨細(xì)胞病毒感染的時(shí)機(jī)選擇極其重要性。
　　方法：
　?。?）選取8周齡雌性SPF級(jí)SD大鼠18只，按照雌雄2:1配對(duì)，懷孕大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、先天性HCMV感染組和非先天性HC

2、MV感染組，每組各6只。在孕第7~8天，先天性感染組的孕鼠行腹腔內(nèi)注射5×107L－1半數(shù)組織培養(yǎng)感染量（TCID50）HCMV懸液0.8mL，對(duì)照組的孕鼠腹腔內(nèi)注射等量的人胚肺成纖維細(xì)胞上清液，非先天性感染組仔鼠于生后第2天顱內(nèi)注射相同HCMV懸液15ul。
　?。?）實(shí)驗(yàn)前后觀察對(duì)比孕鼠及子代大鼠的行為學(xué)變化；子代大鼠生后4周分別每組隨機(jī)抽取6只，運(yùn)用Morris水迷宮的方法對(duì)比評(píng)價(jià)子代大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能；
　　（3）子

3、代大鼠出生后4周分別從每組隨機(jī)抽取8只，取出仔鼠腦組織，采用HE染色的方法觀察仔鼠海馬的形態(tài)學(xué)變化及病理學(xué)改變；應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)大鼠海馬組織NMDA受體NR1、NR2B亞基表達(dá)情況。
　?。?）采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)后分析。
　　結(jié)果：
　?。?）行為學(xué)觀察：對(duì)照組孕鼠及子代大鼠無(wú)異常表現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組（先天性感染組與非先天性感染組）均出現(xiàn)明顯的行為學(xué)異常表現(xiàn)。
　　（2）HE染色病理學(xué)：對(duì)

4、照組海馬結(jié)構(gòu)正常，無(wú)神經(jīng)細(xì)胞缺失現(xiàn)象，細(xì)胞排列整齊均勻，胞核完整，核仁明顯；與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組（先天性感染組與非先天性感染組）子代大鼠出現(xiàn)不同程度的海馬區(qū)神經(jīng)元缺失或水腫、組織結(jié)構(gòu)松散、顆粒層細(xì)胞減少、細(xì)胞核消失等現(xiàn)象。
　　（3）子代大鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)：先天性感染組子代大鼠第1~4天的逃避潛伏期分別（dl:95.83±18.36；d2:70.36±11.52；d3:52.73±11.39；d4:38.96±5.27），

5、比對(duì)照組第1~4天逃避潛伏期（dl:46.98±16.74；d2:29.83±10.64；d3:22.41±12.16；d4:15.69±6.24）延長(zhǎng)，兩組間差異存在顯著性（P<0.01）；非先天性感染組子代大鼠第1~4天的逃避潛伏期分別（dl:89.69±16.15；d2:68.27±9.83；d3:49.85±12.21；d4:35.41±5.51），比對(duì)照組間差異存在顯著性（P<0.01）。Morris水迷宮空間探索能力比較,先

6、天性感染組穿越平臺(tái)次數(shù)3.96±1.47,顯著低于對(duì)照組7.95±1.59（P<0.01）；非先天性感染組穿越平臺(tái)次數(shù)4.38±1.22，亦顯著低于對(duì)照組（P<0.01）。先天性感染組目標(biāo)象限游泳時(shí)間占總時(shí)間的百分?jǐn)?shù)（0.19±0.16）、非先天性感染組（0.23±0.10），也均低于對(duì)照組（0.45±0.12）,差異具有顯著性（P<0.01）。（4）子代大鼠免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：海馬DG區(qū)，先天性感染組NR1（0.176土0.033）

7、、NR2B（0.120土0.029），非先天性感染組NR1（0.202土0.036）、NR2B（0.141土0.026）較對(duì)照組NR1（0.286土0.031）、NR2B（0.182土0.024）均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pa＜0.01）。海馬CA1區(qū)，先天性感染組NR1（0.232土0.021）、NR2B（0.189土0.027），非先天性感染組NR1（0.257土0.028）、NR2B（0.215土0.024）較對(duì)照組NR1（0.3

8、21土0.026）、NR2B（0.283土0.023）均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pa＜0.01）。
　　結(jié)論：
　?。?）人巨細(xì)胞病毒先天性感染組和非先天性感染組大鼠模型建立成功；
　?。?）根據(jù)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果，HCMV先天性感染和非先天性感染均可導(dǎo)致子代大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力受損；
　?。?）HCMV先天性感染組和非先天性感染組子代大鼠海馬區(qū)HE染色光鏡下觀察海馬組織,均可出現(xiàn)病理學(xué)改變；