PRMT2在乳腺癌細(xì)胞tamoxifen耐藥性中的作用初步研究.pdf

1、目的：研究PRMT2對(duì)乳腺癌細(xì)胞TAM耐藥產(chǎn)生的影響，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討，為耐藥性乳腺癌的治療提供新思路。
　　方法：以體外培養(yǎng)的MDA-MB-231細(xì)胞和MCF-7細(xì)胞為研究對(duì)象，研究PRMT2在TAM誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡過程中的作用及其相關(guān)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)包括3部分（1）通過流式細(xì)胞術(shù)，從細(xì)胞水平檢測(cè)TAM對(duì)乳腺癌細(xì)胞凋亡的影響；（2）通過激光共聚焦技術(shù)明確 PRMT2及ER-ɑ36的亞細(xì)胞定位；（3）利用蛋白質(zhì)免疫印跡法，從蛋白

2、水平分析TAM對(duì)乳腺癌細(xì)胞PRMT2、ER-ɑ36及P-Akt表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：1.流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示：MCF-7細(xì)胞株經(jīng)不同濃度TAM處理4小時(shí)后，與對(duì)照組相比，2μM、5μM、7.5μM藥物處理組細(xì)胞的凋亡率明顯增加，且TAM具有劑量依賴性的促細(xì)胞凋亡效應(yīng)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。然而，在相同藥物濃度作用下，MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡率要明顯低于MCF-7細(xì)胞，說明MDA-MB-231細(xì)胞對(duì)TAM相對(duì)耐藥。<

3、br>　　2.免疫熒光、激光共聚焦結(jié)果顯示：在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞中，PRMT2及ER-ɑ36的亞細(xì)胞定位在細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中，表明PRMT2和ER-ɑ36在該細(xì)胞系中存在共定位。
　　3. WB結(jié)果顯示，在對(duì)TAM相對(duì)敏感的MCF-7細(xì)胞株中，不同濃度TAM（0μM、2μM、5μM、7.5μM）處理細(xì)胞4小時(shí)后，P-Akt表達(dá)水平明顯下調(diào)，且呈劑量依賴性，而此細(xì)胞株中 PRMT2及ER-ɑ36的表達(dá)水平無明顯變化；然而，

4、在對(duì) TAM相對(duì)耐藥的MDA-MB-231細(xì)胞株中，PRMT2的表達(dá)水平下調(diào)，伴隨著 ER-ɑ36與P-Akt表達(dá)水平明顯上調(diào)，三者變化都具有劑量依賴性特點(diǎn)。進(jìn)一步利用兩種乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行TAM時(shí)效研究，結(jié)果與各自TAM量效處理組相一致。
　　結(jié)論：1.PRMT2與ER-α36在乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中存在共定位。
　　2.在MDA-MB-231細(xì)胞中，PRMT2可能參與TAM耐藥，機(jī)制與TAM下調(diào)PRMT2表達(dá)，提高