PRMT2對乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的影響及機制研究.pdf

1、目的：探討蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2（protein. arginine. methyltransferase.2，PRMT2）對人乳腺癌細胞MDA-MB-231侵襲與遷移的影響及可能的機制。
　　方法：將構(gòu)建好的真核表達載體瞬時轉(zhuǎn)染至MDA-MB-231細胞，Western Blot檢測EMT相關(guān)蛋白的表達，觀察PRMT2對乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的影響；建立PRMT2高表達的穩(wěn)定細胞系MDA-MB-231-PRMT

2、2，顯微鏡觀察PRMT2高表達后細胞形態(tài)的變化，Transwell及劃痕實驗檢測PRMT2高表達對細胞侵襲及遷移能力的影響，Western Blot檢測EMT相關(guān)蛋白的表達，進一步驗證和分析PRMT2對MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的影響；蛋白質(zhì)芯片技術(shù)檢測PRMT2影響細胞的可能信號通路，Western Blot檢測通路相關(guān)蛋白的表達，初步探討PRMT2影響乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的機制。
　　結(jié)果:1.We

3、stern Blot結(jié)果顯示PRMT2瞬時高表達后E-cadherin的表達水平下調(diào)（p＜0.05），Slug和Vimentin的表達水平上調(diào)（p＜0.05）；PRMT2瞬時低表達后E-cadherin的表達水平上調(diào)（p＜0.05），Slug和Vimentin的表達水平下調(diào)（p＜0.05）。
　　2.PRMT2穩(wěn)定高表達后，顯微鏡觀察到明顯的形態(tài)變化，Transwell實驗表明四環(huán)素誘導(dǎo)組細胞侵襲率較無四環(huán)素誘導(dǎo)組增加（p＜0.0

4、01），劃痕實驗顯示細胞遷移率無明顯改變（p＞0.05），對EMT相關(guān)蛋白表達水平的影響均與瞬時轉(zhuǎn)染的結(jié)果一致。
　　3.蛋白質(zhì)芯片結(jié)果提示W(wǎng)nt/β-catenin可能為PRMT2影響細胞侵襲與遷移的信號通路，且磷酸化GSK-3β(Ser9)表達上調(diào)（p＜0.05），磷酸化β-catenin表達下調(diào)（p＜0.05）。
　　結(jié)論：1.PRMT2促進乳腺癌MDA-MB-231細胞EMT形成。
　　2.PRMT2促進乳腺癌