耐碳青霉烯類的腸桿菌科細(xì)菌耐藥機(jī)制和院內(nèi)流行的研究.pdf

1、目的：
　　了解本院臨床分離的耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌（CRE）的臨床分布和院內(nèi)感染情況，對(duì)出現(xiàn)爆發(fā)流行的病區(qū)進(jìn)行 CRE耐藥機(jī)制的研究和流行病學(xué)描述。為掌握我院 CRE流行的一手資料，為針對(duì)性制定相應(yīng)的防控措施提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　2015年至2016年在本院收集非重復(fù)CRE菌株55株。通過回顧性分析其臨床分布特征和耐藥譜，使用改良 Hodge試驗(yàn)檢測(cè)其是否產(chǎn)碳青霉烯酶；使用 PCR引物擴(kuò)增并通過采用雙脫氧

2、鏈終止法測(cè)序驗(yàn)證耐藥基因；對(duì)MHT試驗(yàn)和PCR檢測(cè)碳青霉烯酶的結(jié)果符合程度使用四格表配對(duì)T檢驗(yàn)和κ系數(shù)分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)；對(duì)其中出現(xiàn)發(fā)生爆發(fā)流行的病區(qū)的CRE菌株，使用ERIC-PCR和MLST分型技術(shù)研究各個(gè)菌株之間的同源性；使用質(zhì)粒接合試驗(yàn)研究其耐藥基因擴(kuò)散機(jī)制；PBRT技術(shù)研究其質(zhì)粒的同源性。
　　結(jié)果：
　　對(duì)全院兩年收集的CRE菌株分析發(fā)現(xiàn)：本院CRE菌株以肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌為主。主要檢出科室為新生兒科。標(biāo)本

3、類型以痰、尿?yàn)橹?。分離出CRE的主要患者為新生兒和＞60歲的老年患者。平均住院時(shí)間41天。大部分患者能通過治療達(dá)到好轉(zhuǎn)甚至治愈。2015年檢出CRE9株，主要集中在第二季度。2016年檢出CRE36株，主要集中在第四季度。β內(nèi)酰胺類耐抗生素藥率＞95％。喹諾酮類和氨基糖苷類抗生素的耐藥率＜60%。甲氧芐啶/磺胺甲噁唑的耐藥率＞80%。MHT試驗(yàn)陽性率90.9%。碳青霉烯酶基因擴(kuò)增以NDM為主，KPC、VIM、IMP陽性菌株各1株，另有1

4、0株CRE未檢出碳青霉烯酶基因。ESBLs基因擴(kuò)增結(jié)果為TEM陽性47株，SHV陽性44株。可移動(dòng)性基因元件擴(kuò)增IntI陽性40株。MHT試驗(yàn)和PCR擴(kuò)增試驗(yàn)比較，McNemar檢驗(yàn)結(jié)果為P=0.063，κ一致性系數(shù)為0.621，P＜0.001，表明兩種檢驗(yàn)方法在檢測(cè)碳青霉烯酶上存在一致性。對(duì)新生兒病區(qū)收集的35株CRE分析發(fā)現(xiàn)：新生兒病區(qū)檢出CRE為陰溝腸桿菌和肺炎克雷伯菌。臨床診斷以新生兒肺炎為主。70.6%的CRE引起感染。上半年

5、主要檢出陰溝腸桿菌，下半年僅檢出肺炎克雷伯菌。本病區(qū)CRE對(duì)β內(nèi)酰胺類抗生素耐藥率＞95%，喹諾酮類抗生素的耐藥率為0%。氨基糖胺類抗生素耐藥率＜4%，與全院的結(jié)果明顯不同。所有菌株均NDM和TEM和Int I陽性，SHV陽性34株（C5陰性）。ERIC電泳顯示陰溝腸桿菌屬于同一個(gè)組，MLST分型ST757。則肺炎克雷伯菌可以分為三個(gè)組，分別歸屬為ST105，ST347和ST1547，并以ST1547型菌株為主。NDM基因成功地從35株

6、CRE菌株上轉(zhuǎn)移至大腸埃希菌J53上，并表現(xiàn)出耐碳青霉烯類的性狀。所有CRE和接合菌株均檢出IncP質(zhì)粒。
　　結(jié)論：
　　⑴肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌是本院的主要流行菌株；⑵患者普遍身體狀況差；⑶本院CRE感染大部分病人治療效果較好；⑷本院CRE主要碳青霉烯酶為NDM型酶；⑸MHT試驗(yàn)和PCR耐藥基因擴(kuò)增結(jié)果一致性程度較高，兩種方法可在實(shí)踐中結(jié)合使用，發(fā)揮各自優(yōu)點(diǎn)；⑹新生兒病區(qū)2016年出現(xiàn)CRE的垂直傳播和水平傳播，傳播方