耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌耐藥機制及同源性分析.pdf

1、目的：對我院腸桿菌科細菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥機制進行研究，及其同源性進行流行病學調(diào)查，旨在為我院預防和控制多重耐藥的腸桿菌科細菌感染及臨床指導用藥提供實驗室依據(jù)。
　　方法：在重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院篩選了2009年11月～2011年4月全部腸桿菌科細菌對碳青霉烯類抗生素不敏感的共34株。用Vitek2 Compact全自動藥敏檢測系統(tǒng)進行細菌鑒定、常規(guī)藥敏檢測及MIC值測定；先把產(chǎn)碳青霉烯酶菌株用改良Hodge實驗做篩選；P

2、CR擴增常見耐藥基因和Ompk35/36基因并進行測序分析；細菌外膜蛋白是否缺失依靠SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測；PCR擴增Int1、Int2和Int3整合酶基因；質(zhì)粒接合和消除試驗研究細菌耐藥基因的傳播方式。ERIC-PCR對細菌進行同源性分析。
　　結(jié)果：從1876株臨床腸桿科細菌中共檢測出34株，全部對厄他培南不敏感，合并對亞胺培南不敏感的有8株。19株細菌MHT陽性。常見耐藥基因擴增結(jié)果顯示，攜帶ESBLs耐藥基因的有3

3、0株，耐藥基因blaTEM、blaSHV、blaCTX－M－3和blaCTX－M－14都有陽性菌株存在；各檢測出攜帶blaDHA和blaACT1兩種AmpC耐藥基因的細菌3株；8株攜帶blaIMP基因，14株攜帶blaOXA基因。5株肺炎克雷伯菌都攜帶Ompk35/36基因，不攜帶碳青霉烯酶基因的三株菌，Ompk35/36基因表達量下調(diào)。8株大腸埃希菌、1株陰溝腸桿菌和3株肺炎克雷伯菌有外膜缺失現(xiàn)象。27株菌Int1整合酶基因擴增陽性，

4、包括6株大腸埃希菌、17株陰溝腸桿菌和4株肺炎克雷伯菌。未擴增出Int2和Int3整合酶基因。除骨科一株陰溝腸桿菌外，其余33株細菌質(zhì)粒消除和接合試驗均成功。ERIC-PCR結(jié)果表明，12株大腸埃希菌分為3個基因型，17株陰溝腸桿菌分為6個基因型，5株肺炎克雷伯菌為一個基因型。
　　結(jié)論：厄他培南為底物的篩選產(chǎn)碳青霉烯酶菌株的效果優(yōu)于亞胺培南。我院耐藥菌所產(chǎn)碳青霉烯酶以金屬酶IMP-8和絲氨酸蛋白酶OXA-1為主，不產(chǎn)碳青霉烯酶的