自體微小顆粒骨載萬古霉素復式微球復合治療感染性骨缺損的實驗研究.pdf

1、目的：
　　感染性骨缺損是指骨缺損的同時伴有感染而導致骨不愈合,是骨科臨床工作中遇到的較為棘手的問題之一。感染性骨缺損通常由兩種情況造成：一是由高能量損傷導致嚴重的開放性骨折、不徹底的清創(chuàng)、早期不恰當?shù)膬?nèi)固定等因素繼發(fā)骨髓炎，導致肢體感染性骨缺損；二是外傷或慢性疾病導致的肢體軟組織缺損感染，引起骨質破壞，骨質吸收或死骨排出形成慢性骨髓炎進而導致肢體感染性骨缺損。感染性骨缺損治療的難點主要有：一是局部骨組織抗感染能力差、局部感染難以

2、控制，使骨組織的修復受阻造成的；二是骨缺損處骨組織的填充修復。在臨床治療中發(fā)現(xiàn)引起感染性骨缺損的最常見病原體是革蘭氏染色陽性的金黃色葡萄球菌，高達80%的病例中可分離到金黃色葡萄球菌。萬古霉素是目前臨床上治療MRSA(耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)感染疾病首選用藥。臨床上多采用靜脈應用敏感抗生素4～6周來控制感染。由于其生物半衰期短、易耐藥、需要大量反復使用，經(jīng)靜脈滴注造成腎毒性、耳毒性之外還有諸多的副作用，因此局部抗生素緩釋系統(tǒng)的運用越來

3、越受到人們的重視。本實驗設計了一種新的抗菌素緩釋系統(tǒng)（載萬古霉素的PLGA/CS復式緩釋微球），該復式載藥微球可緩慢、持續(xù)的釋放抗生素以提高病變部位的抗生素濃度達到有效控制感染的目的，并且該復式載藥微球可降解、對人體無害，不影響骨細胞的活性。該復式微球前期進行的體外實驗已獲得較好的抗菌效果。本研究將在動物體內(nèi)實驗以檢驗載萬古霉素復式微球結合自體微小顆粒骨支架的抗菌及對骨缺損的修復效果，探索一種感染性骨缺損治療的新方法，為其臨床應用提供實

4、驗依據(jù)。
　　實驗方法：
　　取48只健康新西蘭大耳白兔，按沈霖造模法造成雙側橈骨中上段骨髓炎模型兔。4周后根據(jù)清創(chuàng)術的操作規(guī)范對骨髓炎局部進行規(guī)范徹底清創(chuàng)，咬除死骨并擴大咬除范圍以便在橈骨中上段造成長度1.5cm的節(jié)段性骨缺損，將造模成功后的新西蘭大耳白兔隨機分為3組，每組16只。A組在骨缺損區(qū)植入自體微小顆粒骨進行治療；B組在骨缺損區(qū)植入自體微小顆粒骨和萬古霉素進行治療；C組在骨缺損區(qū)植入自體微小顆粒骨和載萬古霉素的PL

5、GA/CS緩釋微球微球進行治療。分別測定術前1天、術后1天、術后3天、術后1周、術后2周、術后4周各時間點每只家兔CRP（血清C反應蛋白）和ESR（血沉），并于術后2周、術后4周、術后8周、術后12周各時間點每組隨機處死4只家兔觀察植骨區(qū)大體形態(tài)，影像學X線和組織學結果并進行評分。
　　結果：
　　1.一般情況：術后各家兔分籠喂養(yǎng)，無一例死亡。術后1～2d所有兔精神、飲食稍差,活動少,無畏寒發(fā)熱征象。手術傷口無紅腫、滲液等。

6、3d后精神好轉,飲食正常,活動增加。
　　2.大體形態(tài)觀察：術后2周，A組1只家兔植骨部位出現(xiàn)竇道，流出膿性分泌物，A、B、C組中其余家兔骨缺損處均以肉芽組織橋接,骨折端間沒有連接，大體上無明顯差異,C組肉芽組織量略多；術后4周，A組骨缺損處被纖維組織覆蓋,B、C組兩骨折斷端間為軟骨痂所填充，類似軟骨組織；術后8周，C組軟骨痂已被明顯的硬骨痂所取代，硬骨痂成紅褐色，硬骨痂變致密，A、B組上述演變稍差，A組最差只有少部分軟骨痂被硬骨

7、痂取代；術后12周，各組缺損段基本愈合完畢，C組硬骨痂表面開始出現(xiàn)骨皮質樣的光滑致密表面，剖面中心部位變疏松，有髓腔形成。
　　3.血清C反應蛋白：術后第1周時CRP（血清C反應蛋白）檢測值C組低于B組，差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05），B組低于A組，差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05），第4周時CRP（血清C反應蛋白）檢測值A組仍處在較高的水平，B、C組基本達到正常水平。
　　4.血沉：術后第2周時ESR（血沉）檢測值C組低于

8、B組，差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05），B組低于A組，差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05），第4周時ESR（血沉）檢測值A組仍處在較高的水平，B、C組基本達到正常水平。
　　5.植骨區(qū)影像學X線觀察及評分： Lane-Sandhu X線評分示：術后2、4、8周 C組X線評分明顯優(yōu)于A、B組（P<0.05），B組優(yōu)于 A組（P<0.05）；術后第12周X線6.評分A、B、C組3組分值相比差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　7

9、.植骨區(qū)組織學觀察及評分：Lane-Sandhu組織學評分示：術后2、4、8周C組組織學評分明顯優(yōu)于 A、B組（P<0.05），B組優(yōu)于A組（P<0.05）；術后12周B、C組組織學評分優(yōu)于A組（P<0.05），B、C組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　結論：
　　1、治療兔感染性骨缺損時與自體微小顆粒骨植入組相比，自體微小顆粒骨載萬古霉素組和自體微小顆粒骨載萬古霉素PLGA/CS復式微球組的抗感染能力更強。