新型載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架修復(fù)感染性骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:1.利用靜電紡絲技術(shù)制備可局部緩釋萬古霉素的新型載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架，驗(yàn)證抗生素緩釋效果、抑菌效果以及細(xì)胞相容性。2.通過植入兔感染性骨缺損模型，觀察載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架對感染性骨缺損的修復(fù)效果。
　　方法:1.將萬古霉素和聚乳酸乙醇酸溶解于六氟異丙醇配制電紡液，利用靜電紡絲工藝紡出載萬古霉素納米纖維復(fù)合于牛脫蛋白松質(zhì)骨支架表面。然后通過掃描電鏡觀察新型載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架和牛

2、脫蛋白松質(zhì)骨支架的表面特征、高效液相色譜法檢測新型抗生素緩釋支架藥物釋放速率、抑菌實(shí)驗(yàn)觀察支架的體外抗菌效果。最后將各組支架與兔間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)以觀察其對細(xì)胞增殖的影響。2.構(gòu)建新西蘭大白兔橈骨感染性骨缺損模型，隨機(jī)分為三組，分別植入相應(yīng)支架，A組（載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架，12只)，B組（未載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架+靜脈注射萬古霉素1月，12只)，C組（未載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架，12只)。8w后

3、進(jìn)行X線觀察及評分后，處死各組實(shí)驗(yàn)動物無菌取材進(jìn)行HE染色觀察及評分和細(xì)菌定量培養(yǎng)，對感染性骨缺損修復(fù)效果進(jìn)行評估。
　　結(jié)果:1.靜電紡絲紡出載有萬古霉素的聚乳酸乙醇酸納米纖維緊密貼附于脫蛋白松質(zhì)骨支架表面，其中納米纖維直徑約100～1200nm，表面孔徑大小約1～5μm。體外釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示洗脫液中第1d的萬古霉素藥物濃度濃度最高，隨后逐漸緩慢釋放，維持在最小抑菌濃度以上的時(shí)間為4w。體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了經(jīng)靜電紡絲工藝處理后

4、的萬古霉素活性仍存在，有效抑菌圈可以維持至4w。載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架與兔間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示細(xì)胞增殖速度與其他兩組的細(xì)胞增殖速度之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。2.植入支架8w后，放射性和組織學(xué)評分A組、B組和C組之間有顯著差異(P＜0.05)，A組成骨效果良好，骨痂和骨小梁較多，炎癥細(xì)胞與纖維組織的較其他兩組不明顯。A組載萬古霉素納米纖維膜脫蛋白松質(zhì)骨支架可明顯降低感染部位的細(xì)菌量，與B組、C組相比有顯