肝星狀細(xì)胞對(duì)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化的影響.pdf

1、目的：通過大鼠肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells，HSCs)與大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(rat adipose tissue-derived mesenchymal stem cells，rADSCs)在內(nèi)皮細(xì)胞分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的共培養(yǎng)，觀察HSCs對(duì)rADSCs向內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cells，ECs)分化的影響和rADSCs向ECs分化過程中BMP信號(hào)通路的活化情況。
　　方法：共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)設(shè)置四

2、組，陽性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組。誘導(dǎo)培養(yǎng)2周后，利用多細(xì)胞共培養(yǎng)技術(shù)、CCK8法、流式細(xì)胞技術(shù)、免疫熒光技術(shù)、Western blotting法、細(xì)胞遷移試驗(yàn)、低密度脂蛋白吞噬試驗(yàn)和體外成血管試驗(yàn)等研究技術(shù)觀察檢測(cè)各組rADSCs向ECs的分化情況和rADSCs向ECs分化過程中BMP信號(hào)通路的活化情況。
　　結(jié)果：誘導(dǎo)2周后，三組rADSCs細(xì)胞體積逐漸變小變圓，部分細(xì)胞出現(xiàn)典型的內(nèi)皮細(xì)胞鵝卵石樣改變;四組細(xì)胞v

3、WF、VE-Cadherin和表達(dá)均陽性;Western blotting檢測(cè)結(jié)果與免疫熒光結(jié)果一致，實(shí)驗(yàn)組eNOS蛋白表達(dá)明顯高于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P＜0.05);內(nèi)皮細(xì)胞遷移試驗(yàn)顯示，實(shí)驗(yàn)組每視野下細(xì)胞遷移數(shù)目明顯高于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P＜0.01);低密度脂蛋白吞噬試驗(yàn)顯示，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞吞噬DiI-Ac-LDL的能力明顯高于空白對(duì)照組(P＜0.05);體外成血管試驗(yàn)顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞體外成血管的能力明顯高于其他三組細(xì)胞——陽

4、性對(duì)照組(P＜0.05)、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P＜0.01)。BMP信號(hào)通路檢測(cè)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞BMP4表達(dá)水平和Smad1/5蛋白磷酸化水平明顯高于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P＜0.01);而在BMP4信號(hào)通路被Noggin抑制后，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞Smad1/5蛋白磷酸化水平顯著降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論：HSCs可以通過促進(jìn)BMP4蛋白表達(dá)，上調(diào)SMAD1/5蛋白磷酸化水平激活BMP信號(hào)通路，從而促進(jìn)rADSCs向ECs