HOXA9與Ki-67在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、背景:
　　結(jié)腸癌是消化道常見的惡性腫瘤之一，是全世界癌癥死亡的主要原因。近年來，隨著我國人民生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的改變，結(jié)腸癌的發(fā)病率和病死率正在逐年上升。結(jié)腸癌已居我國惡性腫瘤死因的第5位，僅次于肺癌、胃癌、肝癌和食管癌。結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展是一個多因素、多階段共同參與的復(fù)雜的生物學(xué)過程，目前由于對結(jié)腸癌分子生物學(xué)發(fā)病機制尚不完全明了，對它早期發(fā)現(xiàn)和預(yù)后判斷也不夠完善，因此積極探索結(jié)腸癌形成的分子機制，研究預(yù)測其生物學(xué)行為的標(biāo)

2、志物對結(jié)腸癌的早期診斷、治療及預(yù)后判斷具有重要意義。
　　目的:
　　通過檢測正常結(jié)腸組織、結(jié)腸癌癌旁組織和結(jié)腸癌組織中同源異形盒基因HOXA9和細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67的mRNA及蛋白表達(dá)情況，探討同源異形盒基因HOXA9和細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義，為結(jié)腸癌的臨床治療和預(yù)后判斷尋找新的腫瘤標(biāo)志物。
　　方法:
　　采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測同源異形盒基因HOX

3、A9及細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67在60例結(jié)腸癌組織、癌旁組織和正常結(jié)腸組織中的mRNA表達(dá)水平。采用蛋白印記法(Western blot)檢測HOXA9在結(jié)腸癌組織和正常結(jié)腸組織中的蛋白表達(dá)水平。采用免疫組化方法(Immunohistochemistry)進(jìn)一步檢測HOXA9及Ki-67在60例結(jié)腸癌組織、癌旁組織和正常結(jié)腸組織中的蛋白表達(dá)，并明確其在結(jié)腸癌細(xì)胞中的表達(dá)定位，分析HOXA9與患者性別、發(fā)病年齡、腫瘤直徑大小、腫瘤分化程度、

4、TNM分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。以上方法檢測HOXA9及Ki-67在60例結(jié)腸癌組織、癌旁組織和正常結(jié)腸組織之間的表達(dá)差異，運用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1、同源異形盒基因HOXA9陽性為細(xì)胞質(zhì)或/及細(xì)胞膜中出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒表達(dá)反應(yīng)物，在結(jié)腸癌組織中HOXA9表達(dá)陽性率為74％(44/60)，而在正常結(jié)腸組織和結(jié)腸癌癌旁組織中表達(dá)陽性率為20%(12/60)和26.7%(16/60)，結(jié)

5、腸癌組織中HOXA9表達(dá)明顯高于正常結(jié)腸組織，有顯著性差異(P<0.05)。同源異形盒基因HOXA9mRNA的相對表達(dá)含量為(0.638±0.045)，明顯高于正常結(jié)腸組織(0.154±0.033)和癌旁組織(0.256±0.038)，HOXA9mRNA在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)含量為正常結(jié)腸組織的4.14倍，差異有顯著性(P<0.05)。
　　2、Western blot證實，HOXA9蛋白表達(dá)水平在結(jié)腸癌組織中表達(dá)顯著高于配對正常組

6、織，與PCR及免疫組化結(jié)果一致。
　　3、細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67陽性為細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒表達(dá)反應(yīng)物，在結(jié)腸癌組織中細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67表達(dá)陽性率為80%(48/60)，而在正常結(jié)腸組織和結(jié)腸癌癌旁組織中表達(dá)陽性率為16.7%(10/60)和20%(12/60)，結(jié)腸癌組織中Ki-67表達(dá)亦明顯高于正常結(jié)腸組織，有顯著性差異(P<0.05)。細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67mRNA在正常結(jié)腸組織、結(jié)腸癌癌旁組織和結(jié)腸癌組織中均有不

7、同程度的表達(dá)，相對表達(dá)量分別為0.164±0.025、0222±0.045、0.585±0.039，Ki-67mRNA在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)含量為正常結(jié)腸組織的3.57倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　4、在結(jié)腸癌患者中，同源異形盒基因HOXA9表達(dá)與患者的發(fā)病年齡、性別、腫瘤直徑無明顯相關(guān)性(P均大于0.05)，而與腫瘤細(xì)胞分化程度、TNM分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)。TNM分期越晚、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越早、腫瘤

8、分化程度越差，HOXA9表達(dá)量越高。
　　5、在結(jié)腸癌患者中，細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67表達(dá)亦與結(jié)腸癌的腫瘤細(xì)胞分化程度、TNM分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)，與患者發(fā)病年齡、性別、腫瘤直徑大小亦無明顯相關(guān)性(P>0.05)。
　　6、在結(jié)腸癌組織中，同源異形盒基因HOXA9表達(dá)陽性組Ki-67陽性表達(dá)為90.9%，明顯高于同源異形盒基因HOXA9陰性組的表達(dá)50%，Pearson卡方值為12.27，P值小于0.

9、001，可認(rèn)為二者表達(dá)有聯(lián)系；Kappa值為0.44，介于0.4至0.75之間，顯示同源異形盒基因HOXA9與細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67的表達(dá)在結(jié)腸癌中表達(dá)具有一致性，一致性程度為中度一致，表達(dá)結(jié)果一致性較為滿意。
　　結(jié)論:
　　1、HOXA9在正常結(jié)腸組織、結(jié)腸癌癌旁組織及結(jié)腸癌組織中的表達(dá)呈逐漸增高的趨勢，提示同源異形盒基因HOXA9與結(jié)腸癌的發(fā)生有著密切關(guān)系，HOXA9基因的表達(dá)上調(diào)能夠促進(jìn)正常結(jié)腸細(xì)胞向腫瘤細(xì)胞分化，

10、在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展的過程中可能扮演著重要角色。
　　2、HOXA9的表達(dá)強度與結(jié)腸癌的腫瘤分化程度、TNM分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，TNM分期越晚、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越早、腫瘤分化程度越差，HOXA9表達(dá)量就越高，提示同源盒基因HOXA9在促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞增值、浸潤及轉(zhuǎn)移過程中起著重要作用。HOXA9高表達(dá)可能成為判斷結(jié)腸癌惡性程度高，患者預(yù)后差的信號之一。
　　3、HOXA9與Ki-67在結(jié)腸癌中的表達(dá)具有一致性，提示HOXA9可