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文檔簡介
1、[背景和目的]
胸腺瘤在人體腫瘤中是發(fā)病率較低的腫瘤,起于胸腺組織,多發(fā)于前上縱膈,兒童發(fā)病率低,成人發(fā)病率高,男女發(fā)病率未見明顯差異。胸腺瘤在臨床上多表現(xiàn)為良性行為,臨床表現(xiàn)結合影像學檢查多可明確診斷,治療多是以手術治療為主。胸腺瘤預后多較好,術后生存率較高。現(xiàn)認為p53、Ki-67在各種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉移及預后中可能起著重要作用,研究表明,在胸腺瘤組織中存在p53、Ki-67過表達,且p53與Ki-67的表達呈正相
2、關,這提示p53與Ki-67在胸腺瘤細胞惡變中起重要作用,共同影響著胸腺瘤的發(fā)生、發(fā)展過程。本實驗目的是探討p53和Ki-67的表達在人胸腺瘤發(fā)生、侵襲和轉移中的臨床意義及其相互關系。
[資料與方法]
1、臨床資料:研究對象為鄭州大學第一附屬醫(yī)院胸外科2005年7月至2009年6月收治的50例胸腺瘤患者,其中男28例,女22例;年齡2~73歲,平均年齡38歲。所有標本均為手術切除所得,均經組織病理學檢查確診。
3、全部標本均由10%甲醛固定,石蠟包埋,切片厚4μm。
2、試劑和方法:采用免疫組化SP法,鼠抗人p53單克隆抗體,鼠抗人Ki-67單克隆抗體,SP免疫組織化學試劑盒及二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒均購自福州邁新生物試劑公司。操作步驟按照SP免疫組織化學試劑盒說明操作。用已知陽性切片作為陽性對照,以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照。
3、結果判斷:p53蛋白及Ki-67蛋白均定位于細胞核。陽性染色是
4、指顯微鏡下觀察細胞內具有清晰可見定位準確的黃色或棕褐色顆粒,背景清晰。標本經免疫組化染色后,由3位以上病理科的醫(yī)生對切片進行評價。在400倍視野下任意選擇5個視野,每個視野計數(shù)200個細胞。細胞無陽性反應或者陽性細胞數(shù)<10%即為陰性,陽性細胞數(shù)>10%即為陽性。用已知陽性切片作陽性對照,PBS代替一抗作陰性對照。
4、統(tǒng)計學分析:實驗相關數(shù)據(jù)應用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學上的分析,用X2檢驗及Fisher's精確
5、概率法進行顯著性檢驗,應用Spearman等級相關進行相關性分析。
[結果]
1.p53在5例正常胸腺組織全部陰性表達,在A+AB型、B1+B2+B3型、C型胸腺瘤患者中的陽性表達呈明顯遞增趨勢,分別為50.0%、84.0%、85.7%。組間比較差異有統(tǒng)計學意義。p53在Masaoka分期Ⅰ期患者中陽性表達率(46.7%)顯著低于Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ期(80.0%),差異有統(tǒng)計學意義。
2.Ki-67在5
6、例正常胸腺組織中無1例陽性表達,在A+AB型、B1+B2+B3型、C型胸腺瘤患者中的陽性表達呈明顯遞增趨勢,分別為50.0%、88.0%、85.7%。組間比較差異有統(tǒng)計學意義。Ki-67在Masaoka分期Ⅰ期患者中陽性表達率(53.3%)顯著低于Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ期(82.9%),差異有統(tǒng)計學意義。
3.P53和Ki-67在胸腺瘤中表達的相關性分析在胸腺瘤中p53和Ki-67的表達呈顯著正相關。
[結論]
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