維生素D對糖皮質(zhì)激素免疫抑制模型小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：通過觀察維生素D對糖皮質(zhì)激素誘導的免疫抑制模型小鼠免疫學指標的影響，探討維生素D對免疫功能低下的調(diào)節(jié)作用及部分機制。
　　方法：實驗小鼠隨機分成5組：對照組、模型組和維生素 D低、中、高劑量組。模型組小鼠連續(xù)3天腹腔注射地塞米松（25 mg/kg體重）建立免疫抑制小鼠模型，對照組小鼠連續(xù)3天腹腔注射與地塞米松相同體積的注射用水；低、中、高劑量組小鼠在建立模型的基礎(chǔ)上，于腹腔注射地塞米松的第一天，同時分別給予三個不同劑量（4、

2、6、10 IU/g體重）1,25(OH)2D3灌胃處理，模型組和對照組于注射的第一天，同時灌胃給予0.2ml的注射用水，連續(xù)7天；。于實驗的第8天，小鼠稱重，摘眼球取血，EDTA抗凝，然后斷頸處死小鼠，無菌取脾和胸腺，分別稱重，計算小鼠胸腺、脾臟指數(shù)；制備脾細胞懸液，經(jīng)過刀豆素 A（T淋巴細胞活化劑）刺激后，采用 MTT法檢測小鼠脾臟 T淋巴細胞增殖指數(shù)，同時吸取細胞培養(yǎng)上清，采用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測白細胞介素-2的濃度；采用全自動血細

3、胞分析儀檢測小鼠外周血白細胞總數(shù)及分類，采用流式細胞術(shù)檢測外周血 T淋巴細胞及其亞群、B淋巴細胞及NK細胞的百分比。
　　結(jié)果：
　　1.模型組小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、脾臟淋巴細胞增殖指數(shù)、外周血淋巴細胞百分比、脾臟T淋巴細胞產(chǎn)生白細胞介素-2的能力及外周血B淋巴細胞、除NK T淋巴細胞以外的T淋巴亞群均明顯低于對照組，而NK T淋巴細胞百分比與對照組相比明顯增高。
　　2.維生素D不同劑量組小鼠胸腺指數(shù)均明顯高于模型

4、組，并且隨著劑量增高，胸腺指數(shù)有增高的趨勢；而給予不同劑量的維生素D對小鼠的脾臟指數(shù)無明顯影響。3.維生素D中劑量組淋巴細胞增殖指數(shù)明顯高于模型組，但仍低于對照組的增殖指數(shù)；維生素D低劑量組和維生素D高劑量組與模型組相比較，增殖指數(shù)無明顯差異。
　　4.維生素D中劑量組小鼠脾淋巴細胞培養(yǎng)上清液中白細胞介素-2的濃度明顯高于模型組；但維生素 D低劑量組和維生素 D高劑量組與模型組相比，白細胞介素-2水平無明顯差異。
　　5．維

5、生素D中劑量組外周血淋巴細胞數(shù)量明顯高于模型組；而白細胞是隨著維生素D使用藥劑量的增加而逐漸升高。
　　6.維生素D低劑量組外周血B淋巴細胞百分比明顯高于模型組。維生素D中劑量組及維生素D高劑量組與模型組無明顯差異。
　　7.維生素 D低劑量組外周血自然殺傷細胞百分比與模型組相比有增高的趨勢。而維生素 D高劑量組自然殺傷細胞百分比明顯低于模型組。當維生素 D給藥劑量增加時，自然殺傷細胞百分比有降低的趨勢。
　　8.維生

6、素D低劑量組CD4+淋巴細胞百分比低于模型組，隨著維生素D給藥劑量的增加， CD4+淋巴細胞百分比逐漸增高。維生素D低劑量組的CD8+淋巴細胞百分比較模型組明顯降低。維生素D中劑量組與維生素D高劑量組CD4+/CD8+值較模型組明顯升高，而維生素 D低劑量組與模型組不具有明顯差異，隨維生素 D給藥劑量增高，CD4+/CD8+值也隨之增高。
　　結(jié)論：維生素D可以改善糖皮質(zhì)激素誘導的免疫抑制小鼠的免疫功能，不同劑量的維生素D對免疫調(diào)