Ghrelin通過影響Dkk-1的表達(dá)調(diào)控WNT信號通路改善糖尿病大鼠認(rèn)知功能.pdf

1、目的：探討Ghrelin對糖尿病大鼠海馬組織Tau蛋白及WNT信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，明確WNT信號通路在糖尿病大鼠學(xué)習(xí)和記憶功能紊亂中所發(fā)揮的作用。
　　方法：將雄性SD大鼠60只隨機(jī)平均分為四組：NC組（對照組， n=15）、DM組（DM，n=15）、DM1組（DM+Ghrelin，n=15組）、DM2組（DM+Ghrelin+D-lys3-GHRP-6，n=15組）。腹腔注射STZ構(gòu)建糖尿病大鼠模型，Morris水迷宮實

2、驗評價大鼠空間學(xué)習(xí)能力和記憶能力；電鏡觀察大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元微觀結(jié)構(gòu)，普通顯微鏡下觀察HE染色后大鼠各組海馬 CA1區(qū)神經(jīng)元形態(tài)特點；ELISA檢測大鼠血清DKK-1的表達(dá)；熒光定量PCR檢測大鼠海馬DKK-1、β-catenin、磷酸化GSK-3β及總Tau mRNA水平；Western blot檢測大鼠海馬DKK-1、磷酸化β-catenin、GSK-3β、總Tau及磷酸化Tau的蛋白水平；免疫組化檢測大鼠海馬中DKK-1、β-

3、catenin的蛋白表達(dá)；免疫熒光檢測大鼠海馬中磷酸化GSK-3β、磷酸化Tau的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：糖尿病組與正常對照組相比，在目標(biāo)象限中穿越平臺次數(shù)顯著下調(diào)，逃避潛伏期顯著上調(diào)（P＜0.05）；神經(jīng)元細(xì)胞腫脹、線粒體空泡變性（P＜0.05），神經(jīng)元細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞核固縮等；血清、海馬組織中DKK-1、海馬組織中p-Tau的表達(dá)明顯升高（P＜0.05），海馬中β-catenin、P-GSK-3β表達(dá)下降（P＜0.05）。Gh

4、relin干預(yù)組大鼠與糖尿病組相比較，穿越平臺次數(shù)顯著上調(diào)，逃避潛伏期明顯下調(diào)（P＜0.05）；神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)完整，線粒體發(fā)達(dá)、密度增加（P＜0.05），神經(jīng)元排列整齊、細(xì)胞層數(shù)清晰；血清、海馬組織中 DKK-1、海馬組織中 p-Tau的表達(dá)明顯降低（P＜0.05），海馬中β-catenin、P-GSK-3β的表達(dá)升高（ P＜0.05）。聯(lián)合應(yīng)用 Ghrelin和 GHSR-1a受體拮抗劑Ghrelin+D-lys3-GHRP-6后，G