Ang(1-7)對糖尿病大鼠海馬GFAP、GDNF表達及其認知功能的影響.pdf

1、第一部分 Ang（1-7）對糖尿病大鼠海馬星形膠質(zhì)細胞GFAP表達及其認知功能的影響
　　目的：研究血管緊張素（1-7）[Angiotensin(1-7),Ang(1-7)]對糖尿病大鼠海馬膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）表達的影響，探討Ang（1-7）對糖尿病大鼠認知功能的影響及其作用機制。
　　方法：SD雄性大鼠隨機分為正常對照組（NC組）、糖尿病組（DM組）、

2、Ang(1-7)組（DM1組）與Ang(1-7)+A779組（DM2組），10只/組。單次腹腔注射 STZ建立糖尿病模型，高血糖持續(xù)12周后進行 Morris水迷宮實驗,測試各組大鼠學習及空間記憶功能。DM1組大鼠側(cè)腦室注射Ang(1-7)(5nmol/天，1ul),DM2組側(cè)腦室注射Ang(1-7)(5nmol/天，1ul)+A779(50nmol/天，1ul),NC組和DM組大鼠側(cè)腦室各注射1ul生理鹽水，連續(xù)注射1周后，再次進行M

3、orris水迷宮實驗。尼氏染色觀察海馬神經(jīng)元形態(tài)變化，免疫組織化學法檢測海馬中GFAP的表達。
　　結(jié)果：Ang(1-7)干預前， DM組、DM1組及 DM2組大鼠分別與 NC組相比，逃避潛伏期明顯延長（P<0.05），在目標象限穿越平臺次數(shù)明顯降低（P<0.05），而DM組、DM1組及DM2組各大鼠之間逃避潛伏期和在目標象限穿越平臺次數(shù)差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。Ang(1-7)干預后，與NC組相比，DM組大鼠逃避潛伏期延

4、長，穿越平臺次數(shù)減少（P<0.05），神經(jīng)元存活數(shù)目減少（P<0.05），海馬區(qū)GFAP表達減少（P<0.05）；與DM組相比，DM1組大鼠逃避潛伏期縮短（P<0.05），穿越平臺次數(shù)增加（P<0.05），神經(jīng)元存活數(shù)目增加（P<0.05），海馬區(qū)GFAP表達增加（P<0.05）；與DM1組相比，DM2組大鼠逃避潛伏期延長，穿越平臺次數(shù)減少（P<0.05），神經(jīng)元存活數(shù)目減少（P<0.05），海馬區(qū)GFAP表達減少（P<0.05）。

5、r>　　結(jié)論：1.高血糖持續(xù)12周后，SD大鼠水迷宮成績下降，海馬區(qū)神經(jīng)元存活數(shù)目減少，GFAP的表達水平明顯下降；
　　2.Ang(1-7)與 Mas結(jié)合后對糖尿病大鼠認知障礙有改善作用，可能與上調(diào)海馬區(qū)GFAP表達、減少神經(jīng)元凋亡有關(guān)。
　　第二部分 Ang(1-7）對糖尿病大鼠海馬GDNF、caspase-3的表達及認知功能的影響
　　目的：研究Ang(1-7)對糖尿病大鼠海馬膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（glial

6、 cell line-derived neurotrophic factor,GDNF）、caspase-3表達的影響。
　　方法：SD雄性大鼠隨機分為正常對照組（NC組）、糖尿病組（DM組）、Ang(1-7)組（DM1組）與Ang(1-7)+A779組（DM2組），10只/組。單次腹腔注射 STZ建立糖尿病模型，高血糖持續(xù)12周后進行 Morris水迷宮實驗,測試各組大鼠的學習及空間記憶功能。DM1組大鼠側(cè)腦室注射 Ang(1-

7、7)(5nmol/天，1ul),DM2組側(cè)腦室注射 Ang(1-7)(5nmol/天，1ul)+A779(50nmol/天，1ul),NC組和DM組大鼠側(cè)腦室各注射1ul生理鹽水，連續(xù)注射1周后，再次進行 Morris水迷宮實驗。RT-PCR和Western blot分別檢測海馬GDNF mRNA和蛋白水平的表達；免疫組織化學方法檢測caspase-3表達的變化。
　　結(jié)果：Ang(1-7)干預前，DM組、DM1組及DM2組大鼠分

8、別與NC組相比，逃避潛伏期明顯延長（P<0.05），在目標象限穿越平臺的次數(shù)明顯降低（P<0.05）,而DM組、DM1組及DM2組各大鼠之間逃避潛伏期和在目標象限穿越平臺的次數(shù)差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。Ang(1-7)干預后，與NC組相比，DM組大鼠逃避潛伏期延長，穿越平臺次數(shù)減少（P<0.05），海馬區(qū)GDNF mRNA及蛋白水平表達下降（P<0.05）， caspase-3陽性細胞明顯增多（P<0.05）。DM1組大鼠學習和