DFMG調(diào)控氧化損傷VECs TLR4表達(dá)對(duì)VSMCs增殖與遷移的影響.pdf

1、目的:
　　觀察一種活性新化學(xué)實(shí)體，7-二氟亞甲基-5，4-二甲氧基異黃素(7-difluoromethoxy-5,4'-dimethoxygenistein，DFMG)能否通過(guò)調(diào)控?fù)p傷內(nèi)皮細(xì)胞(vascular endothelial cells，VECs) TLR4表達(dá)干預(yù)共培養(yǎng)模型中平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)的增殖和遷移。
　　方法:
　?、儆肨ranswe

2、ll法建立VECs-VSMCs共培養(yǎng)模型，用LPC誘導(dǎo)VECs的損傷。采用CCK-8法和Transwell遷移法測(cè)定不同濃度的LPC誘導(dǎo)的VECs的損傷對(duì)VSMCs的增殖和遷移的影響。應(yīng)用ELISA法分析不同濃度的LPC誘導(dǎo)的損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中VECs IL-6和TNF-α的表達(dá)量。采用Western blot和熒光定量PCR測(cè)定損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中VECs TLR4在蛋白水平和基因水平的表達(dá)。

3、　?、诓捎肅CK-8法測(cè)定不同濃度和不同作用時(shí)間的DFMG能否干預(yù)損傷VECs與VSMCs的共培養(yǎng)模型中VSMCs的增殖。并且，運(yùn)用TLR4過(guò)表達(dá)和TLR4沉默的轉(zhuǎn)染技術(shù)，采用CCK8法和Transwell遷移法測(cè)定DFMG能否通過(guò)抑制VECs TLR4的表達(dá)干預(yù)共培養(yǎng)模型中VSMCs的增殖和遷移。
　　結(jié)果:
　　①隨著LPC濃度的增加，LPC誘導(dǎo)的VECs損傷引起VSMCs增殖和遷移的效應(yīng)增強(qiáng);
　　②隨著LPC濃

4、度的增加，LPC誘導(dǎo)的損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中VECs的TNF-α和IL-6的分泌增加，并且選取30μM作為L(zhǎng)PC誘導(dǎo)的共培養(yǎng)模型的最佳濃度;
　?、跮PC誘導(dǎo)的損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中損傷VECs的TLR4在蛋白水平和基因水平的表達(dá)均增高;
　　④DFMG抑制損傷VECs與VSMCs共培養(yǎng)模型中VSMCs的增殖，其干預(yù)作用呈現(xiàn)一定的時(shí)間-濃度依賴特性;
　?、軹LR4過(guò)表達(dá)具有與LPC類(lèi)似的作