SE對(duì)TLR4信號(hào)通路調(diào)節(jié)雛雞空回腸pIgR表達(dá)的影響.pdf

1、本試驗(yàn)以1日齡海蘭褐雛雞空腸和回腸組織為研究對(duì)象，利用RT-PCR的方法檢測(cè)雛雞空腸、回腸、十二指腸和盲腸組織中pIgR mRNA的表達(dá)量;利用分子克隆技術(shù)，在體外克隆兔抗雛雞pIgR多克隆抗體;通過口服腸炎沙門氏菌(Salmonella Enteritidis，SE)的方法感染雛雞，于感染后的1d、3d、7d和14d，利用熒光定量PCR的方法檢測(cè)雛雞空腸和回腸組織中TLR4信號(hào)通路中TLR4、TRAF6、MyD88、NF-κB和pIg

2、R mRNA的表達(dá)量;Western Blot檢測(cè)雛雞空腸和回腸組織中pIgR蛋白表達(dá)水平;旨在探討SE對(duì)TLR4信號(hào)通路調(diào)節(jié)雛雞pIgR的影響，結(jié)果表明:
　　(1)利用原核表達(dá)載體融合雛雞pIgR蛋白，免疫雄性新西蘭大白兔，成功制備了兔抗雛雞pIgR多克隆抗體。
　　(2) SE感染雛雞空腸組織，實(shí)驗(yàn)組TLR4、TRAF6、MyD88、NF-κB和pIgR mRNA表達(dá)在1d開始上調(diào)，且NF-κB mRNA表達(dá)明顯升高（

3、P＜0.05）;到第3d時(shí)，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組對(duì)比發(fā)現(xiàn)，TLR4 mRNA表達(dá)量明顯上調(diào)(P＜0.05)，pIgR mRNA表達(dá)量明顯提高(P＜0.01);隨后基因表達(dá)開始下調(diào)，至第14d，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中TLR4、TRAF6、MyD88、NF-κB和pIgR mRNA表達(dá)量差異不顯著。結(jié)果表明，雛雞感染SE后，TLR4信號(hào)通路被激活，且空腸組織中pIgR mRNA的表達(dá)量升高。
　　(3) SE感染雛雞回腸組織，實(shí)驗(yàn)組TLR4、T

4、RAF6、MyD88、NF-κB和pIgR mRNA表達(dá)量在1d開始上調(diào)，且NF-κB mRNA表達(dá)量升高(P＜0.05);到第3d時(shí)，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組對(duì)比發(fā)現(xiàn)，TLR4、MyD88和pIgR mRNA表達(dá)量極顯著升高(P＜0.01)，而TRAF6 mRNA表達(dá)量明顯提高(P＜0.05);隨后基因表達(dá)量開始下調(diào)，至14d時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中TLR4、TRAF6、MyD88、NF-κB和pIgR mRNA表達(dá)量差異不顯著。結(jié)果表明，雛雞感