RRM1、BRCA1在晚期NSCLC的表達(dá)與吉西他濱-鉑類治療臨床研究.pdf

1、背景與目的：
　　肺癌是排名首位的腫瘤致死疾病，其中非小細(xì)胞肺癌（Non-small Cell Lung Cancer, NSCLC）的所占比例為總量的85％左右。在新發(fā)肺癌病例中約2/3以上的患者確診時(shí)已屬晚期（ⅢB／Ⅳ期），無(wú)法再進(jìn)行根治切除，只能選用更為保守的放化療。對(duì)于晚期非小細(xì)胞肺癌的標(biāo)準(zhǔn)化療方案為含鉑的兩聯(lián)療法，其中吉西他濱聯(lián)合鉑類(GP)是常用的方案，并在晚期肺鱗癌中作為一線治療方案之一。研究報(bào)道吉西他濱聯(lián)合鉑類方案

2、治療晚期非小細(xì)胞肺癌的客觀緩解率為30%~40%，中位生存率8~10個(gè)月，總體上五年生存率低于15%，且治療后的腫瘤緩解情況存在明顯的個(gè)體差異。
　　許多抗癌藥物針對(duì)DNA作為靶點(diǎn)，腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的敏感性與其自身DNA的損傷修復(fù)能力密切相關(guān)。RRM1和 BRCA1基因是核苷酸切除修復(fù)（Nucleotide Excision Repair，NER）系統(tǒng)中的兩個(gè)重要成員。吉西他濱是嘧啶類抗代謝化療藥物核苷酸類似物，與RRM1相應(yīng)位

3、點(diǎn)結(jié)合,核糖核苷酸還原酶的功能受到干擾導(dǎo)致脫氧核苷酸的合成減少，最終影響DNA的合成。所以，在整個(gè)非小細(xì)胞肺癌的治療過(guò)程當(dāng)中，監(jiān)測(cè)患者體內(nèi)的 RRM1的數(shù)量以及狀態(tài)十分必要，需要我們更加重視對(duì)這項(xiàng)技術(shù)的研究和改進(jìn)。BRCA1作為一種抑癌基因，參與細(xì)胞各種應(yīng)答反應(yīng)?；仡櫺匝芯拷Y(jié)果分析，含鉑方案化療的NSCLC患者， BRCA1低、中表達(dá)者較高表達(dá)者死亡風(fēng)險(xiǎn)明顯降低，可能預(yù)示著高表達(dá)BRCA1基因的患者對(duì)含鉑類療效差或耐藥。提示BRCA1可

4、作為一個(gè)NSCLC重要預(yù)后和化療預(yù)測(cè)性因素。為明確GP化療方案兩種藥物對(duì)療效的影響，解決對(duì)非小細(xì)胞肺癌治療敏感性問(wèn)題，我們擬收集接受GP方案治療晚期非小細(xì)胞肺癌患者的血液和組織標(biāo)本，檢測(cè)RRM1和BRCA1基因表達(dá)量和化療反應(yīng)及預(yù)后的關(guān)系。
　　本研究使用熒光實(shí)時(shí)定量方法檢測(cè)晚期非小細(xì)胞肺癌患者腫瘤組織和外周血 RRM1與BRCA1表達(dá)，得到相應(yīng)的數(shù)據(jù)，然后與病人的臨床表現(xiàn)以及化療效果相結(jié)合，整理出一個(gè)更加可行的檢測(cè)方法，從而對(duì)吉

5、西他濱聯(lián)合鉑類方案化療法的效果進(jìn)行預(yù)測(cè)，從而在臨床治療決策中可以對(duì)非小細(xì)胞肺癌的化療方案選擇進(jìn)行進(jìn)一步的改進(jìn)和完善。非小細(xì)胞肺癌患者痰液脫落細(xì)胞檢測(cè)微小染色體維持蛋白5基因表達(dá)，以及血液中檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)臨床研究，采用多種方式進(jìn)行針對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷研究，期望尋找到對(duì)肺癌疾病合適、方便、易行、敏感的檢測(cè)手段。
　　研究方法：
　　確診為ⅢB／Ⅳ期晚期非小細(xì)胞肺癌患者，采用吉西他濱/順鉑組成的NSCLC化療方案，對(duì)外周血

6、和腫瘤組織標(biāo)本的RRM1和BRCA1 mRNA基因進(jìn)行實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)。首先,對(duì)RRM1和BRCA1 mRNA表達(dá)水平和病人臨床表現(xiàn)、性別、病癥程度、是否吸煙關(guān)系進(jìn)行分析。其次,對(duì) RRM1和 BRCA1 mRNA表達(dá)與 GP方案化療療效的關(guān)系進(jìn)行分析。第三,分析患者的臨床及病理特征、RRM1和BRCA1 mRNA表達(dá)與生存時(shí)間之間關(guān)系。對(duì)痰液脫落細(xì)胞進(jìn)行微小染色體維持蛋白5基因表達(dá)檢測(cè),設(shè)計(jì)方法使用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PC

7、R)半定量流程，以及檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)，使用流式細(xì)胞分析聯(lián)合免疫磁珠富集技術(shù)。
　　結(jié)果：
　　RRM1、BRCA1高表達(dá)與低表達(dá)組間，患者的年齡、性別、吸煙狀況、TNM分期、病理類型之間都不存在顯著差異。在外周血中RRM1和BRCA1之間不存在相關(guān)性。外周血和腫瘤組織中 RRM1的表達(dá)量呈顯著正相關(guān)，外周血和腫瘤組織中BRCA1的表達(dá)量呈顯著正相關(guān)。RRM1和BRCA1低表達(dá)組的治療效果優(yōu)于高表達(dá)組

8、，而外周血和腫瘤組織中二者表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)，提示外周血檢測(cè)RRM1和BRCA1基因表達(dá)水平可能作為預(yù)測(cè)晚期非小細(xì)胞肺癌患者接受GP方案化療的預(yù)測(cè)因子。對(duì)痰液脫落細(xì)胞進(jìn)行微小染色體維持蛋白5基因表達(dá)檢測(cè),設(shè)計(jì)方法使用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)半定量流程，以及非小細(xì)胞肺癌患者隨著TNM分期的增高，外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)分級(jí)以及CTCS數(shù)目有增多的趨勢(shì)。
　　結(jié)論：
　　RRM1和BRCA1低表達(dá)組的非小細(xì)胞肺癌患者在

9、接受吉西他濱聯(lián)合鉑類方案進(jìn)行化療時(shí)，所產(chǎn)生的治療效果更佳，可以延長(zhǎng)患者生存期。外周靜脈血和肺癌組織中RRM1和BRCA1表達(dá)呈顯著正相關(guān)，可以利用相對(duì)便利且應(yīng)用廣泛的方法對(duì)外周血中RRM1和BRCA1基因表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)來(lái)預(yù)測(cè)GP方案化療反應(yīng)?？梢愿佑嗅槍?duì)性的給病人制定治療方案，分析哪些的非小細(xì)胞肺癌患者接受吉西他濱聯(lián)合鉑類方案進(jìn)行化療，效果更好。通過(guò)痰脫落細(xì)胞檢測(cè)MCM5,對(duì)肺癌患者早期診斷提供有效手，非小細(xì)胞肺癌患者分級(jí)檢測(cè)外周血循環(huán)