I型單純皰疹病毒通過其皮層蛋白UL41逃逸viperin抗病毒作用的分子機(jī)制.pdf

1、天然免疫系統(tǒng)是抵抗病原微生物入侵的第一道防線，其中 I型干擾素（interferon, IFN-I）介導(dǎo)的抗病毒天然免疫是宿主防御病毒感染的主要形式。病毒感染可誘導(dǎo)大多數(shù)類型的細(xì)胞分泌IFN-I，后者與位于細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，并誘導(dǎo)超過300種干擾素刺激基因（interferon-stimulates gene，ISG）的表達(dá)，其中 viperin（virus inhibitory protein, endoplasmic ret

2、iculum associated, interferon inducible）已被證明具有直接的抗病毒活性。
　　Viperin由Cig5基因編碼，最初在感染人巨細(xì)胞病毒（human cytomegalovirus, HCMV）的成纖維細(xì)胞中被鑒定出來；隨后，其mRNA序列被正式命名為viperin。Viperin的組成型表達(dá)水平較低。但是，IFN-I、脂多糖和poly(I:C)均能強(qiáng)烈誘導(dǎo)其表達(dá)。除HCMV外，許多DNA和RN

3、A病毒均可誘導(dǎo)viperin表達(dá)并抑制這些病毒的復(fù)制，包括偽狂犬病毒（PRV）、丙型肝炎病毒（HCV）、流感病毒和登革熱病毒（DENV）等。因此，viperin也被視作抗病毒蛋白。然而，viperin在人類I型單純皰疹病毒（Herpes simplex virus type1, HSV-1）復(fù)制中的作用尚未見報(bào)道。本研究重點(diǎn)探討viperin在HSV-1感染中的作用以及病毒逃逸viperin抗病毒作用的分子機(jī)制。
　　盡管vipe

4、rin可以拮抗多種DNA或RNA病毒感染，而我們的病毒感染水平實(shí)驗(yàn)表明，viperin對(duì)野生型（WT）HSV-1的增殖和病毒蛋白的表達(dá)均無影響。篩選實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，外源超表達(dá)的HSV-1皮層蛋白UL41下調(diào)viperin的表達(dá)。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，WT HSV-1和外源超表達(dá)的UL41可降解viperin的mRNA含量，而UL41缺失（ΔUL41）HSV-1對(duì)viperin的mRNA水平?jīng)]有影響。同時(shí)，外源轉(zhuǎn)染的viperin顯著抑制ΔUL41

5、 HSV-1的復(fù)制，而對(duì)WT HSV-1的復(fù)制則沒有影響。RNA干擾實(shí)驗(yàn)表明，干擾HEK293T細(xì)胞中viperin表達(dá)可使△UL41 HSV-1滴度升高至接近WT HSV-1水平。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)表明，過表達(dá)viperin可抑制ΔUL41 HSV-1的復(fù)制，但對(duì)ΔUs11 HSV-1的復(fù)制沒有影響。這些結(jié)果均表明，HSV-1逃逸viperin抗病毒作用的分子機(jī)制是通過其具有核酸內(nèi)切酶活性的皮層蛋白UL41降解viperin的mRNA得以實(shí)